Tesis doctoral de Nuria Romero Isart
Con el objetivo de utilizar las metalotioneínas en la depuración de aguas contaminadas por metales pesados se han sintetizado la mt de ratón y sus fragmentos alfa y beta mediante técnicas de ingeniería genética. Se han analizado las propiedades coordinantes de estas proteínas con cd(ii) a ph 7 mediante valoraciones con dicho metal seguidas por varias técnicas: dicroismo circular, absorción electrónica y espectrometría de masas electrospray. El resultado de la valoraciones confirma la funcionalidad de las mt recombinantes y permite caracterizar por primera vez el fragmento beta de mt. Con el fin de aumentar la estabilidad de las proteinas en atmósfera aeróbica se ha planteado la sustitución de residuos de cys por otros aminoácidos coordinantes y a la vez estables. El modelaje de formas mutantes de mt con cys substituidas por his, glu o asp ha predicho la viabilidad de la mutación desde un punto de vista estructural. El estudio con péptidos sintéticos derivados de mt permite comprobar que la sustitución de cys por his no impide que el péptidico coordine co(ii), zn(ii) o cd(ii). Finalmente se han estudiado las propiedades coordinantes de formas mutantes de mt obtenidas mediante técnicas de mutagénesi dirigida. Se ha analizado como afecta la mutación en la capacidad de unir zn(ii) in vivo i cd(ii) in vitro. El análisis de las propiedades ópticas y quirales de las proteínas ha permitido observar como afecta el cambio en la estructura de los agregados metálicos correspondientes y en la afinidad de la proteína por el cd(ii). El comportamiento de los mutantes demuestra que la mutación no altera las habilidades quelatantes de la metalotioneína.
Datos académicos de la tesis doctoral «Bioeliminacio de metalls pesants: metal lotioneines recombinants silvestres i mutades com agents complexants de zn (ii) i cd (ii).«
- Título de la tesis: Bioeliminacio de metalls pesants: metal lotioneines recombinants silvestres i mutades com agents complexants de zn (ii) i cd (ii).
- Autor: Nuria Romero Isart
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1998
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Pilar Gonzalez Duarte
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Virtudes Moreno Martinez
- Francesc Xavier Avilés Puigvert (vocal)
- Victor De Lorenzo (vocal)
- Juan Hidalgo Pareja (vocal)