Tesis doctoral de María Jesús Lobo Castañon
Se propone el uso de electrodos de pasta de carbono modificados como biosensores amperometricos para sustratos de deshidrogenasas dependientes de los coenzimas nad+/ nadh. Se han desarrollado y evaluado dos tipos de electrodos modificados par ala deteccion electrocatalitica del nadh generado enzimaticamente: electrodos que utlizan mediadores de transferencia de carga monomeros dispersos en pasta de carbono e inmovilizados mediante membranas de acetato de celulosa y electrodos modificados con polimeros conductores. Se ha descrito por primera vez el efecto catalitico de los polimeros conductores poli (o-aminofenol) (pap) y poli (o-fenilendiamina) (ppd) sobre la oxidacion electroquimica del nadh y se ha utilizado este efecto para la transduccion amperometrica del proceso enzimatico a potenciales aplicados proximos a ov. El proceso catalitico presenta un mecanismo de tipo ce e involucra probablemente la adsorcion previa del nadh reaccionante sobre el polimero conductor, se han determinado las condiciones optimas para la electrogeneracion del polimero y se ha demostrado que las caracteristicas analiticas de estos electrodos polimericos son muy superiores a las de los electrodos que utilizan mediadores monomeros como el colorante fenotiacinico azul de toluidina o. Los electrodos modificados con ppd presentan respuestas amperometricas al nadh lineales entre 10-8my 2×10-7m con limites de deteccion de 1×10-9m y una vida util superior a los 15 dias y mas de 200 determinaciones. ademas, las peliculas del ppd actuan como barreras muy eficaces e impiden la difusion de los biorreactivos (nad+ y enzimas) inmovilizados por dispersion en pasta de carbono, al tiempo que conservan su actividad electrocatalitica para la oxidacion del nadh. Se han desarrollado y evaluado sensores de etanol y lactato basados en este diseño, que se han aplicado a la determinacion de ambos compuestos en bebidas con resultados concordantes con los metodos enzimatico
Datos académicos de la tesis doctoral «Biosensores amperometricos basados en deshidrogenasas dependientes de nad+/nadh.«
- Título de la tesis: Biosensores amperometricos basados en deshidrogenasas dependientes de nad+/nadh.
- Autor: María Jesús Lobo Castañon
- Universidad: Oviedo
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1996
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Paulino Tuñón Blanco
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Antonio Sánchez Misiego
- Pedro Sanchez Lazo (vocal)
- Marta Elena Diaz Garcia (vocal)
- José Manuel Pingarrón Carrazón (vocal)