Tesis doctoral de Esteban Fernandez Moreira
En españa hay un 50% de cepas de de s.Pneumoniae resistentes a penicilina. las fluoroquinolonas (fqs) son un grupo de antimicrobianos alternativos para el tratamiento de las infecciones causadas por esta bacteria. Los blancos de las fqs son las dna topoisomerasas de tipo ii (dna girasay topoisomerasa iv), enzimas esenciales para la viabilidad celular que controlan la topología del dna. Para determinar cúal de estas enzimas es el blanco primario para estos compuestos, clonamos, superproducimos y purificamos por separado mediante cromatografia las subunidades gyra y gyrb de la dna girasa y parc y pare de la topoisomerasa iv. Reconstituimos las enzimas a partir de sus subuinades. Establecimos un ensayo de superenrrollamiento de dna mediado por girasa y otro de decatenación de kdna mediado por topoisomerasa iv. probamos la potencia inhiboria de cuatro fqs representativas sobre estos ensayos. Estos experimentos permitieron determinar bioquimicamente que la topoisomerasa iv es el blanco primario de la fqs en s.Pneumoniae. asimismo se clonó superprodujo y purificó mediante colas de histidinas el dominio amino terminal de gyra, el cual posee el sitio activo de la enzima en concentración y pureza suficiente para su cristalización. Este dominio presento actividad de rotura de doble cadena en presencia de fqs cuando se acompleja con gyrb.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterizacion bioquimica de la dena topoisomerasa de tipo ii de streptococcus pneumoniae«
- Título de la tesis: Caracterizacion bioquimica de la dena topoisomerasa de tipo ii de streptococcus pneumoniae
- Autor: Esteban Fernandez Moreira
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 07/05/2001
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Gonzalez De La Campa Adela
- Tribunal
- Presidente del tribunal: manuel Espinosa padrón
- Antonio Tormo garrido (vocal)
- José Berenguer Carlos (vocal)
- rosario Muñoz moreno (vocal)