Tesis doctoral de María De Los Angeles Gilabert Garcia
Se ha desarrollado un nuevo método de medida para la actividad enzimática de peroxidasa, se ha caracterizado su mecanismo de reacción y su (estereo)especificidad, identificando su etapa limitante. El estudio se ha aplicado a la isoenzima comercial con mayor aplicabilidad, la isoenzima c de peroxidasa de rábano (hrpc). El nuevo método cronométrico de medida permite superar la inestabilidad de los productos de la reacción enzimática de peroxidasa. Ello ha conducido a la caracterización cinética de compuesto ii, frente a un amplio conjunto de sustratos reductores. Se ha descrito un mecanismo cinético ping-pong con etapas de enlace y transformación, demostrando la formación de complejos enzima-sustrato en las tres fases del mecanismo de reacción. La especificidad de sustrato ha sido caracterizada determinando las constantes cinéticas correspondientes, sin y con saturación hiperbólica, estableciendo relaciones estructura-actividad (sar) entre las mismas y descriptores electrónicos de los sustratos reductores. Se ha identificado mediante el estudio del efecto isotópico y su ajuste a la ecuación de marcus, que la etapa limitante del mecanismo de reacción es la trasnterencia electrónica del sustrato a la especie enzimática intermedia compuesto ii. Peroxidasa muestra estereoespecificidad, con mayor afinidad y rapidez de catálisis hacia los estereoisómeros l de los sustratos reductores, fenoles y anilinas.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización cinética del mecanismo de reaccción y la especificidad de sustrato de peroxidasa.«
- Título de la tesis: Caracterización cinética del mecanismo de reaccción y la especificidad de sustrato de peroxidasa.
- Autor: María De Los Angeles Gilabert Garcia
- Universidad: Murcia
- Fecha de lectura de la tesis: 04/03/2005
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Francisco Garcia Cánovas
- Tribunal
- Presidente del tribunal: cecilio Jesús Vidal moreno
- ramón Varón castellanos (vocal)
- Manuel Acosta echeverria (vocal)
- manuela Garcia moreno (vocal)