Tesis doctoral de Sánchez Martinez Ana Belen
El virus de la bursitis infecciosa (ibdv) es un virus icosaédrico de 60 nm de diámetro que carece de envuelta. Esta constituido por dos segmentos de arn bicatenario. El segmento a de 3,2 kpb contiene dos fases de lectura abierta. La orf1 codifica la proteína vp5 de 17kda. La segunda fase de lectura abierta orf2 codifica la poliproteína de 110kda que es procesada autocatalíticamente dando lugar a las proteínas vpx, vp3 y vp4, siendo esta última una lon-proteasa responsable del procesamiento. Posteriormente mediante procesamiento post-traduccional la proteína vpx genera la proteína vp2. El segmento b de 3kpb codifica la proteína vp1 de 90 kda que es la arn polimerasa dependiente de arn. en la presente tesis se ha caracterizado en primer lugar los sitios de procesamiento en la poliproteína mediante mutagénesis dirigida y posterior análisis por expresión transitoria. Se ha demostrado que las secuencias 511laa513 y 754maa756 son las dianas de procesamiento entre las regiones vpx-vp4 y vp4-vp3 485 aqaasgtaraasgkaraas503 contiene tres sitios secundarios de procesamiento en la región vpx y vp4. en busca de un mayor conocimiento y caracterización se analizaron las proteínas virales, mediante electroforesis bidimensional. Esta metodología nos ha permitido determinar la presencia de modificaciones post-traduccionales. se identificaron las proteínas vpx, vp4 y vp3 mediante autoradiografía, tinción de plata y western-blot. Así se demostró la presencia de 4 isoformas mayoritarias de la proteína vp3. Para la detección de las modificaciones responsables de la presencia de las diferentes isoformas de la proteína de vp3 se utilizaron las técnicas de espectrometría de masas y nanoelectrospray. así se pudo confirmar la dimetilación de los residuos 827k y 832k en dos de las isoformas de la proteína vp3.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización de las modificaciones co y post-traduccionales de la poliproteina del virus de la bursitis infecciosa.«
- Título de la tesis: Caracterización de las modificaciones co y post-traduccionales de la poliproteina del virus de la bursitis infecciosa.
- Autor: Sánchez Martinez Ana Belen
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 27/10/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Rodríguez Aguirre José Francisco
- Tribunal
- Presidente del tribunal: julio Coll morales
- ignacio Casal (vocal)
- José María Almendral del rio (vocal)
- amelia Nieto martin (vocal)