Caracterización molecular de subunidades reguladoras de la fosfatasa ppz1 en la levadura saccharomyces cerevisiae

Tesis doctoral de Ivan Muñoz Muñoz

Las fosfatasas de tipo z , codificadas por los genes ppz1 y ppz2, desarrollan un papel importante en la biología de la levadura saccharomyces cerevisiae. en concreto, ejercen un control negativo sobre la tolerancia salina y la progresión del ciclo celular y positivo en el mantenimiento de la integridad celular. En el momento de iniciar este trabajo solo se conocía una subunidad reguladora de estas fosfatasas, conocida con el nombre de hal3 o sis2. esta proteína actúa como inhibidora de todas las funciones concoidas de ppz1. Sin embargo, su mecanismo de actuación es desconocido. el primer objetivo de la tesis ha sido intentar profundizar en la regulación que llevan a cabo las fosfatasas ppz1 y ppz2 en el control de ciclo celular de la levadura. Para ello se ha generado un doble mutante condiconal sit4 hal3 que presenta una parada entre las fases g1 y s del ciclo. Esta cepa se ha transformado con dos genotecas mutlicopia diferentes. Gracias a esto se han podido asilar una serie de genes que, en multicopia son capaces de suprimir el fenotipo de esta cepa. Entre ellos se encuentran elementos reguladores del ciclo celular ya conocidos, algunas fosfatasas, elementos involucrados en homeostasis salina y tres genes cuya función era desconocida por el momento, que han sido renombrados vhs1, vhs2 y vhs3. en segundo lugar, se ha investigado el mecanismo de acción de hal3 sobre la fosfatasa ppz1. Para ello se han estudiado elementos hallados en la secuencia de hal3 posiblemente relevantes para la función de esta proteína. además, se ha realizado una estrategia de mutagénesis al azar de la zona más conservada de hal3 seguida de una búsqueda de pérdida de función. Esto ha permitido halalr una serie de cambios aminoacídicos únicos que interfieren en la función de hal3. La caracterización bioquímica posterior ha permitido determinar dos regiones en la secuencia de hal3 importantes para la unión a ppz1 y una tercera región impor

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización molecular de subunidades reguladoras de la fosfatasa ppz1 en la levadura saccharomyces cerevisiae«

  • Título de la tesis:  Caracterización molecular de subunidades reguladoras de la fosfatasa ppz1 en la levadura saccharomyces cerevisiae
  • Autor:  Ivan Muñoz Muñoz
  • Universidad:  Autónoma de barcelona
  • Fecha de lectura de la tesis:  03/12/2004

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Joaquin Ariño Carmona
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: emili Itarte fresquet
    • rosa Aligue alemany (vocal)
    • José Miguel Ortiz melon (vocal)
    • Torre ruiz m. angeles de la (vocal)

 

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