Tesis doctoral de Jose Chaves Puertas
La naturaleza genética del gen de la beta-lactamasar shv-1 ha sido analizada en 97 cepas de klebsiella pneumoniae procedentes de productos patológicos humanos y no relacionadas epidemiológicamente. Mediante ieea, se detectaron las bandas de pi 7,6 (shv-1) en 74 cepas, 7,1 (len-1) en 13 cepas y 5,4 (tem-1) en 10 cepas. entre las 74 cepas shc-1, 40 mostraron una doble banda, 20 con pi 7,1 y 20 con pi 5,4. La mayoría de las 74 cepas shv-1 presentaron plásmidos (76,7%). La transferencia por conjugación de la beta-lactamasa shv-1 sólo fue posible en 5 casos (9,3%). Se realizó una pcr-rflp shv-1 específica del dna cromosómico que resultó positiva para 93 de las 97 cepas y fue negativa únicamente en 4 cepas productoras de tem-1. También se analizó el dna cromosómico de las 97 cepas, en un intento de aproximación al locus génico de shv-1 mediante restricción por endonucleasas. (Rflp) y southern-blot. la disgestión con ecori mostró al menos una banda positiva de hibridación en 96 cepas, 2 bandas fueron detectadas en 8 muestras. úNicamente en 1 cepa productoras de la beta-lactamasas tem-1 la hibridación fue negativa. el análisis de las secuencias de dna no mostró diferencias en las regiones promotoras del gen, ni secuencia de fin de la transcripción adicionales; únicamente mutaciones puntuales que determinaron variantes alélicas. Se describieron algunas nuevas variantes que representaron cambios en la secuencia de aminoácidos de la proteína (shv-27, 28, 32 y 33 y la len-2). Como resultado de los estudios de southern-blot y secuenciación podemos postular que shv-1 y len-1 están situados muy cercanos y en tándem en el cromosoma bacteriano de k.Pneumoniae. Nuestros resultados apoyan la hipótesis de que el ancestro de shv-1 fue originado en el cromosoma bacteriano de k.Pneumoniae.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización molecular del gen de la beta-lactamasa shv-1 en klebsiella pneumoniae«
- Título de la tesis: Caracterización molecular del gen de la beta-lactamasa shv-1 en klebsiella pneumoniae
- Autor: Jose Chaves Puertas
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 06/05/2002
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Concepción Segura álvarez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Miguel Regue
- jordi Vila (vocal)
- Luis Martinez (vocal)
- De la torre Rafael (vocal)