Tesis doctoral de Rosario Alvarez Morales
La fosfoenolpiruvato carboxilasa(pepc;ec 4.1.1.31)es una enzima citosólica de muy amplia distribución. Cataliza la b-carboxilación del fosfoenolpiruvato(pep) en presencia de hco3y mg2+ rindiendo oxaloacetato(oaa) y pi. Esta enzima ha sido muy estudiada en plantas c4 y cam, en las que juega un papel esencial en el metabolismo fotosintetico del carbono. La pepc está sometida la regulación por fosforilación reversible en un residuo de serina localizado en el extremo n-terminal de la proteina. La fosforilación in vitro de la pepc induce el cambio en las propiedades cinéticas y de regulación de la enzima, aumentando su velocidad catalítica y afinidad por la glucosa-6-p, y dismuyendo la sensibilidad respecto a su efector negativo, el l-malato. Las enzimas responsables de la fosforilación son las proteínas quinasas. Su identificación, caracterización y la determinación de su modo de activación representa en gran parte el estudio de la señalización en plantas. En este trabajo de tesis hemos caracterizado y purificado la(s)pepc-quinasa(s) de extractos crudos de hojas de sorgo iluminadas o mantenidas en oscuridad, así como en fracciones purificadas,encontrándose actividad quinasa ca2+- dependiente y ca2+-independiente. Resultados obtenidos en este trabajo ponen en evidencia por primera vez que la región c-terminal de la pepc está implicada en el reconocimiento y especificidad de la pepc-quinasa y aporten una prueba concluyente a favor de que la quinasa fisiológica que fosforila a la pepc sea la ca2+ -independiente. Además nuestros resultados permiten afirmar que existen in vivo fenómenos de proteolisis implicados en la regulación de la fosforilación de la pepc. Por otra parte,hemos estudiado la pepc y pepc-quinasa de semillas. En semillas de cebada se muestra por primera que el h-7, un inhibidor de quinasas de tipo pka y pkc, es capaz de actuar in vivo inhibiendo la fosforilación de la pepc. Hemos realizado un estudio compa
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización y regulación de la fosfoenolpiruvato carboxilasa quinasa de hojas y semillas«
- Título de la tesis: Caracterización y regulación de la fosfoenolpiruvato carboxilasa quinasa de hojas y semillas
- Autor: Rosario Alvarez Morales
- Universidad: Sevilla
- Fecha de lectura de la tesis: 09/06/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Cristina Echevarria Ruiz De Vargas
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Francisco Gil Martinez
- jean Vidal (vocal)
- Juan Sanchez garcia (vocal)
- Martinez garcia Mª del carmen (vocal)