Tesis doctoral de Antolín Martín M. Pilar
Esta tesis describe la clonación molecular de varias rips(«ribosome-inactivating proteins») y lectinas presentes en sambucus nigra l. Y muscari armeniacum l. Miller, utilizando la técnica denominada race («rapid amplification of cdna ends»). El saúco (s. Nigra) posee un gran número de rips en diversos tejidos, tanto de tipo 1 como de tipo 2, así como numerosas lectinas. Con este trabajo se ha conseguido la clonación de la nigrina 1,rip de tipo 2 no tóxica presente en las hojas de la planta, asi como de dos lectinas del mismo tejido, una monomérica(snalm) y otra dimérica(snald). Esta última es la primera lectina dimérica aislada en el genero sambucus. El gen de la nigrina 1 incluye la secuencia de un péptido señal y de un péptido de conexión entre sus dos cadenas constituyentes, que son procesados en la maduración de la proteína. Posee una alta homología con el gen de la rip de tipo 2 de corteza nigrina b. Los genes de las lectinas incluyen secuencias equivalente al péptidos señal, parte de la cadena a y péptido de conexión de una rip de tipo 2, que se procesan para rendir las proteínas maduras. este hecho, junto con la elevada homología que presentan con la cadena b de la nigrina 1, hace pensar en un posible origen común de todos estos genes. así mismo, se han obtenido los cdnas correspondientes a cuatro rips de tipo 1 presentes en los bulbos de la especie muscari armeniacum l. Miller, llamadas musarminas, asi como a otra musarmina presente en las hojas. Por comparación con el tamaño de las proteínas nativas se deduce la posibilidad del procesamiento de un péptido(péptido señal) en n-terminal asi como en el extremo c-terminal. posteriormente se llevó a cabo la expresión en escherichia coli de uno de los genes de musarminas de bulbo y la puesta a punto de la purificación de la proteína recombinante. Esta proteína tambien ha sido caracterizada, comprobándose que presenta la misma actividad enzimátic
Datos académicos de la tesis doctoral «Clonación y caracterización de genes de proteínas inactivadoras de ribosomas y lectinas de las especies sambucus nigra l.y muscari aremeniacum (l.) miller.«
- Título de la tesis: Clonación y caracterización de genes de proteínas inactivadoras de ribosomas y lectinas de las especies sambucus nigra l.y muscari aremeniacum (l.) miller.
- Autor: Antolín Martín M. Pilar
- Universidad: Valladolid
- Fecha de lectura de la tesis: 11/12/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Tomas Girbés Juan
- Tribunal
- Presidente del tribunal: manuel Ruiz amil
- carmelo Bernabeu quirante (vocal)
- enrique Mendez corman (vocal)
- Del valle tascon secundino (vocal)