Clonaje, secuenciacion y caracterizacion de nuevos genes de listeria monocytogenes.

Tesis doctoral de M.teresa Mata Vicente

Listeria monocytogenes es un patógeno intracelular de origen alimentario. los análisis de una mutación en el gen gl2, el cual codifica una proteína de superficie, nos permiten pensar que se puede tratar de un receptor de osmolitos. La secuenciación a ambos lados tanto del gen gl2 como de flar nos ha permitido indentificar tres nuevas secuencias codificantes mdetl1, trl1 y sprl1, cuyas correspondientes secuencias de aminoácidos presentan homología con transportadores de flujo de múltiples drogas, un regulador transcripcional y un regulador de antígeno de superficie, respectivamente. los estudios interespecíficos llevados a cabo por hibridación o por pcr demuestran que las secuencias antes mencionadas sólo se encuentran en listeria monocytogenes y en listeria grayi, incluyendo a flar en este grupo de genes. la caracterización del mutante construido mediante la inserción del plásmido pksv7 en el gen mdetl1 nos ha permitido realizar un análisis comparativo de la función del gensalvaje con respecto al gen mutante, apreciándose una mayor sensibilidad de la cepa mutada lotm1 frente a eritromicina, josamicina y clindamicina, con respecto a la cepa salvaje lo28. estas bombas de flujo exportan no sólo antiobióticos, sino también otros compuestos tóxicos para la bacteria, tales como metales pesados, quedanto demostrado que la cepa lotm1 tenía una mayor sensibilidad frente a znso2, cocl4, y k2cro4. Otro compuesto tóxico para la célula es el bromuro de etidio, siendo posible medir el flujo de ésta sustancia, lo que nos permitió demostrar que nuestra proteína funcionaba como una bomba de flujo para dicha sustancia. desde el punto de vista clínico, este gen (mdetl1) es muy interesante ya que la resistencia antibiótica de listerina monocytogenes se ha convertido en un problema creciente desde la aparición de las primeras resistencias en 1988.

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Clonaje, secuenciacion y caracterizacion de nuevos genes de listeria monocytogenes.«

  • Título de la tesis:  Clonaje, secuenciacion y caracterizacion de nuevos genes de listeria monocytogenes.
  • Autor:  M.teresa Mata Vicente
  • Universidad:  Autónoma de Madrid
  • Fecha de lectura de la tesis:  31/03/2000

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • José Claudio Pérez Díaz
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: jose Prieto prieto
    • m.pilar Gonzalo vicente (vocal)
    • Fernando Baquero mochales (vocal)
    • Juan alfonso Ayala serrano (vocal)

 

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