Tesis doctoral de Ferragut Mas Rafel Angel
Se han desarrollado y optimizado sistemas para la detección de anticuerpos anti-nucleares mediante inmunoensayos en fase sólida de tipo elisa. se ha desarrollado un elisa para la detección y cuantificación de anticuerpos anti-dna bicatenario (dsdna) usando dna plasmídico como substrato antigénico. se han optimizado las condiciones de sensibilización de las microplacas y de ejecucción del ensayo, mediante estrategia univariante. Se ha evidenciado la importancia de la fuerza iónica del enzimoinmuno ensayo sobre su eficacia diagnóstica, siendo mucho más específica y sensible para el diagnósitco de lupus eritematosos sistémico la cuantificación de anticuerpos de elevada avidez en condiciones de elevada fuerza iónica. Se ha puesto de manifiesto la utilidad restringida del standard internacional anti-dsdna wo-80 de la oms solo como calibrador para ensayos realizados en condiciones de elevada fuerza iónica y para la cuantificación exclusiva de anticuerpos anti-dsdna de elevada avidez. El elosa desarrollado presenta, respecto a la inmunofluorescencia indirecta sobre crithidia lucilae, valores de sensibilidad y especificidad diagnóstica del 95,4 y 87% respectivamente. Considerando un valor discriminante de 45 ui/ml. se ha desarrollado un elisa cualitativo para la detección de anticuerpos dirigidos contra las proteínas sm, u1-rnp, scl-70, juo-1, ss-a y ss-b del extracto nuclear soluble (ena), utilizando como substrato antigénico una mezcla de péptidos nativos y recombinantes. Las condiciones de sensibilización de las microplacas se han optimizado mediante estrategia multivariante, con un diseño experimental factorial de composición central y utilizando la metodología de las superficies de respuesta para la toma de decisiones sobre las condiciones óptimas de sensibilización. El elisa desarrollado permite determinar la presencia de anticuerpos dirigidos contra cualquiera de los antígenos descritos con una sensibilidad
Datos académicos de la tesis doctoral «Desarrollo de métodos para la determinación de anticuerpos anti-nucleares.«
- Título de la tesis: Desarrollo de métodos para la determinación de anticuerpos anti-nucleares.
- Autor: Ferragut Mas Rafel Angel
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 08/07/1999
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Petraki Munujos Vinyoles
- Tribunal
- Presidente del tribunal: francesc González sastre
- joan Serratosa sarda (vocal)
- Manuel Santamaria ossorio (vocal)
- Antonio Elduque terron (vocal)