Tesis doctoral de Susana Corrales Rocafort
El proceso de plegamiento/desplegamiento es hoy en día uno de los temas más importantes sin resolver en química de proteínas. Dado que la constante dieléctrica del medio y la presencia de enlaces de hidrógeno juegan un papel fundamental, la caracterización del entorno en el que se encuentran estos es un factor determinante. Actualmente, la comprensión de los procesos de plegamiento y la descripción de los factores que intervienen en ellos se efectúa experimentalmente empleando agentes desnaturalizantes. la alfa-la constituye un interesante modelo ya que presenta grandes cambios estructurales en función del ph, temperatura y en presencia de agentes desnaturalizantes, tipo urea e hidrocloruro de guanidina o tipo alcohol. La detección de tales cambios puede efectuarse empleando técnicas espectroscópicas, rmn, fluorescencia, dc y ftir, lo que permtie seguir variaciones en estructura terciaria y/o secundaria. No obstante ninguna de las técnicas citadas permite seguir el proceso a tiempo real, por lo que para ello hemos considerado necesario trabajar además con técnicas de cinéticas rápidas («stopped-flow»). confirmamos la formación de un estado intermedio entre las formas nativa y desnaturalizada, con estructura secundaria pero no terciaria, a todos los ph estudiados. Además, observamos un plegamiento complejo muy dependiente del ph. al estudio de la desnaturalización de la alfa-la bovina en presencia de urea, hidrocloruro de guanidina y disolventes tipo alcohol muestra que el proceso de plegamiento/desplegamiento depende de propiedades propias del disolvente, como la acidez, basicidad y polaridad/polarizabilidad. el uso del ans en la presente tesis pone de manifiesto que el seguimiento del proceso de plegamiento/desplemagimiento debe efectuarse al menos en esta proteína con dos sondas distintas, ya que el ans y los trp monitorizan procesos distintos, presumiblemente zonas de la molécula diferentes.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio del efecto de agentes desnaturalizantes sobre la estructura de proteínas. aplicación a la alfa-lactoalbúmina bovina.«
- Título de la tesis: Estudio del efecto de agentes desnaturalizantes sobre la estructura de proteínas. aplicación a la alfa-lactoalbúmina bovina.
- Autor: Susana Corrales Rocafort
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 04/04/2002
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Francisco García Blanco
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José vicente Sinisterra gago
- Javier Catalan sierra (vocal)
- gerardo Echevarría gorostidi (vocal)
- josefa Donoso pardo (vocal)