Tesis doctoral de Jaime Martín-benito Romero
En este trabajo se ha realizado un estudio pormenorizado, mediante la microscopía electrónica de transmisión, de la interacción existente entre la proteína sticolisina ii y membranas modelo. Dicha proteína es uno de los componentes activos del veneno de la anémona stichodactyla helianthus y se ha mostrado como uno de los agentes hemolíticos más potentes aislados de un ser vivo. en una primera etapa se realizaron ensayos con la finalidad de determinar si existía interacción de la proteína con vesículas preparadas a partir de lípidos naturales. Una vez demostrada la existencia de dicha interacción se procedió a realizar un estudio más detallado que permitiera deducir más datos a cerca de la interacción. Así, en una segunda etapa se llevó a cabo la preparación de cristales bidimensionales de sticolisina ii sobre monocapas de lipídicas de diferentes composiciones. Las micrografías obtenidas de dichos cristales fueron examinadas empleando tratamientos de imágenes basados en métodos de fourier y se demostró que era posible la determinación de la estructura tridimensional de la sticolisina ii, así como de la ultraestructura que forma al interaccionar con lípidos. el análisis detallado de los cristales obtenidos mostró que pertenecían la grupo cristalográfico p22,2 (98x196x51 a). La reconstrucción tridimensional final presenta una proteína con 3 lóbulos, con una longitud máxima de 51 a y una anchura máxima de 39 a. La ultraestructura formada por la sticolisina ii al interaccionar con las monocapas es un poro tetramérico responsable del mecanismo de acción de la toxina. Además, en el proceso de síntesis de cristales se encontró una relación inversa entre la afinidad de la proteína por el lípido que compone la monocapa y la calidad del cristal; esta observación podría ser extrapolable para la cristalización de proteínas con este método.
Datos académicos de la tesis doctoral «Estudio por microscopia electronica de transmision de la proteina hemolitica sticolisina ii y su interaccion con membranas modelo.«
- Título de la tesis: Estudio por microscopia electronica de transmision de la proteina hemolitica sticolisina ii y su interaccion con membranas modelo.
- Autor: Jaime Martín-benito Romero
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1998
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Carlos Barba Solana
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Benjamín Fernández Ruiz
- José Lopez Carrascosa (vocal)
- José Gregorio Gavilanes Franco (vocal)
- José María Valpuesta Moralejo (vocal)