Tesis doctoral de Amparo Fornés Chaves
El trabajo presentado en la memoria es un estudio de la relación estructura-función del segundo bucle intracelular del transportador neuronal de glicina gl yt2. Esta región del transportador contiene una interesante acumulación de residuos polares y cargados, muy conservada en la familia de transportadores de neurotransmisores dependientes de na+ y ci- llamada slc6, algunos de ellos en secuencia consenso de fosforilación por la proteina quinasa c (pkc). Usando una estrategia de mutagénesis dirigida, se ha identificado la posición 422 como crucial en la expresión en membrana, transporte de glicina, dependencia del voltaje y equilibrio conformacional del transportador. además, la sustitución de residuos de il2 por aminoácidos ácidos elimina la respuesta de gl yt2 al éster de forbol pma, indicando que il2 también está implicado en la regulación de la función de glyt2. Pma inhibe de forma especifica y dependiente de la dosis y el tiempo la actividad del transportador, produciendo un efecto consistente con la activación de quinasas de serina/treonina. asimismo, se muestra que la regulación negativa de gl yt2 inducida por pma puede ser simulada por activación de la vía de transducción de señales de la fosfolipasa c (plc), indicando que el efecto de pma se debe principalmente a la acción de pkc. La inhibición de gl yt2 por pma afecta tanto a la actividad de transporte de glicina así como a la expresión en superficie puesto que los parámetros cinéticos vmax y km se reducen tras el tratamiento con pma. el éster de forbol disminuye la expresión en superficie de gl yt2 en estado estacionario aunque no altera la de los mutantes resistentes. Este efecto está mediado por un moderado aumento en la inserción en membrana y un gran incremento el1la internalización, de forma que el tráfico intracelular de gl yt2 se desplaza hacia compartimentos intracelulares mientras que los mutantes resistentes no reducen su expresión en
Datos académicos de la tesis doctoral «Identificación de determinantes estructurales de la función y regulación del transportador neuronal de glicina glyt2.«
- Título de la tesis: Identificación de determinantes estructurales de la función y regulación del transportador neuronal de glicina glyt2.
- Autor: Amparo Fornés Chaves
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 20/05/2005
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Beatriz López Corcuera
- Tribunal
- Presidente del tribunal: jorgina Satrústegui gil-delgado
- raquel Perez (vocal)
- Jesús Gomeza (vocal)
- Manuel Palacín prieto (vocal)