Tesis doctoral de Beatriz Ruiz Diez
El objetivo principal de esta tesis fue el desarrollo de técnicas moleculares específicas para el hongo patógeno humano scedosporium prolificans, encaminadas a adquirir un mayor conocimiento de su taxonomía, variabilidad genética y patogenicifdad, así como aportar alternativas al problema de su resistencia total a los antifúngicos. El análisis de la región del rdna nuclear que comprende los dos espaciadores transcritos y la subunidad 5,5s (itsi-5,8s-itsii) confirmó la relación filogenética entre las dos especies de scedosporium (s.Prolificans y s.Apiospermum). Se estudió la resistencia intrínseca de s.Prolificans a los antifúngicos, y en particular a la anfotericina b. Como alternativa a este problema se evaluaron combinaciones de antimicrobianos, encontrándose un resultado sinérgico en el caso de la anfotericina b combinada con cicloheximida. La comparación de aislados clínicos y ambientales de s.Prolificans no reveló diferencias que pudieran afectar a su virulencia. La amplificación aleatoria de dna polimórfico (rapd) y la amplificación con iniciadores únicos dirigidos a secuencias de minisatélites de eucariotas («pcr-fingerprinting») se emplearon para tipificar cepas de s.Prolificans y estudiar dos brotes de infecciones hospitalarias causadas por s.Prolificans. Se aislaron mediante la luz ultravioleta mutantes de s.Prolificans deficientes en la síntesis de melanina que presentaron la misma resistencia a los antifúngicos que la estirpe salvaje original. También se desarrolló un método de transformación genética de s.Prolificans por electroporación, empleando la resistencia a higromicina b como marcador de selección, y la región del rdna secuenciada previamente para construir un vector específico de s.Prolificas.#
Datos académicos de la tesis doctoral «Introduccion a la biología molecular de csedosporium prolificans (fungi imperfecti).«
- Título de la tesis: Introduccion a la biología molecular de csedosporium prolificans (fungi imperfecti).
- Autor: Beatriz Ruiz Diez
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Joaquin Martinez Suarez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: josé Martínez peinado
- Juan Berenguer berenguer (vocal)
- Fernando Baquero mochales (vocal)
- francisca Vicente perez (vocal)