Tesis doctoral de Diaz Arribas Juan Carlos
La lactasa intestinal (también denominada complejo lactasa-florizín hidrolasa o lph) es una glicosidasa localizada en la membrana de los enterocitos del intestino delgado de mamíferos proyectándose hacia el lúmen del mismo. esta enzima posee dos centros activos diferentes localizados en dos regiones homólogas de la misma cadena polipeptídica: uno de ellos encargado de la hidrólisis de la lactosa (el azúcar más de la leche) y el otro, aunque actualmente se desconoce su sustrato natural, viene siendo tradicionalmente ensayado con el glicósido denominado florizina. en esta tesis, mediante el empleo de inhibidores irreversibles de glicosidasas del tipo 2-desoxi-2-fluoroglicósidos y el concurso de la espectroscopía de masas con ionización asistida por electrospray (esi-ms), ha sido posible asignar inequívocamente cada una de las dos actividades catalíticas de la lactasa intestinal de cordero lechal, lactasa y florizín-hidrolasa, a cada uno de los dos centros activos de la enzima: la actividad lactasa el centro localizado en la región iv de la enzima y la actividad florizín-hidrolasa al centro presente en la región iii. asímismo, mediante experimentos de rmn de «efecto nuclear overhauser transferido» (tr-noe), se ha realizado el estudio de la conformación que en disolución adopta un análogo no hidrolizable de la glucosidasa blga de paenibacillus polymyxa dentro del centro activo de la misma. La información obtenida de estos estudios es útil para conocer el mecanismo catalítico de estas enzimas y para el diseño de inhibidores y análogos de sustrato con diferentes objetivos terapéuticos.
Datos académicos de la tesis doctoral «Marcaje de afinidad y estudios estructurales de centros activos de glicosidasas: lactasa intestinal y otras glicosidasas homologas.«
- Título de la tesis: Marcaje de afinidad y estudios estructurales de centros activos de glicosidasas: lactasa intestinal y otras glicosidasas homologas.
- Autor: Diaz Arribas Juan Carlos
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 17/02/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Francisco Javier Cañada Vicinay
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Moreno muñoz fco. jose
- Manuel Martin lomas (vocal)
- Juan José Aragón reyes (vocal)
- Antonio Planas sauter (vocal)