Tesis doctoral de Kramer Xavier M. Gabriela
El trabajo realizado en esta tesis se ha centrado en la caracterizacion fisica y funcional de los origenes de replicacion de la cadena retrasada (ssoa y ssou) del plasmido de amplio espectro de huesped pmv158. En primer lugar, se acoto in vivo la funcion del ssoa, en un fragmento de 199 pb del plasmido y se comprobo su actividad en diferentes huespedes. Del mismo modo, se establecio la funcion del ssou, en varios hospedadores bacterianos. Se determinaron los puntos desde donde se inicia la sintesis de la cadena retrasada a partir de ambos origenes de replicacion y se analizo la influencia de mutaciones en las regiones conservadas del ssoa en la eficiencia de replicacion (in vivo e in vitro) y especificidad de inicio de esta cadena (in vitro). Para ello, se puso a punto un sistema de replicacion que utiliza extractos acelulares de pneumococos, asi como tambien se consiguieron las condiciones necesarias para la replicacion a partir de estos origenes en el sistema de s. Aureus. Se pudieron determinar algunos de los factores del huesped implicados en la conversion de ss- dsdna plasmidico y al nivel en que estos actuan. Se ideo un sistema de transcripcion in vitro, que permitio la sintesis de rna cebadores a partir de sustratos de dna monocatenario del plasmido pmv158 que contenian la señal ssoa o derivadas de esta. Por ultimo y en base a los resultados obtenidos, se propuso un modelo de replicacion de la cadena retrasada a partir del ssoa, donde se tuvieron en cuenta las secuencias nucleotidicas especificas del plasmido para que la replicacion de esta cadena tenga lugar y los factores del huesped implicados en dicho proceso.
Datos académicos de la tesis doctoral «Origenes de replicacion de la cadena retrasada del plasmido pmv158.«
- Título de la tesis: Origenes de replicacion de la cadena retrasada del plasmido pmv158.
- Autor: Kramer Xavier M. Gabriela
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1997
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Manuel Espinosa Padrón
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Antonio Tormo Garrido
- Juan Carlos Alonso Navarro (vocal)
- Almendral Del Rio José M. (vocal)
- Ramon Diaz Orejas (vocal)