Tesis doctoral de Marc Bruguera Vilalta
El síndrome de sjí¶gren es una enfermedad autoinmune con una preValencia elevada en la población general (entre el 0,5% y el 3%). Como en las demás enfermedades de esta naturaleza, la presencia de anticuerpos antinucleares (ana) está ampliamente aceptada como prueba importante en su diagnóstico. en el caso del síndrome de sjí¶gren, el principal marcador serológico es la presencia de anticuerpos dirigidos contra el antígeno ss-b (la), aunque en algunos casos también se ha descrito la presencia única de anticuerpos dirigidos contra el antígeno ss-a (ro), compuesto por dos proteínas (ro60 y ro52) asociadas a distintos rna citoplasmáticos. en el presente trabajo se describe el procedimiento de obtención de las proteínas antigénicas ss-b (la) y ss-a (ro), para ser utilizadas posteriormente en el desarrollo de dos enzimoinmunoanálisis (elisa anti-ss-b (la) y elisa anti-ss-a (ro)) útiles para la detección de anticuerpos dirigidos contra éllas. La estrategia seguida fue la siguiente: se prepararon tres vectores de expresión en escherichia coli de las tres proteínas (ss-b, ro60 y r052) mediante la tecnología del dna recombinante, se expresaron las tres proteínas recombinantes en los microorganismos procariotas en forma de proteínas de fusión, se purificaron las proteínas por comatografía de afinidad, se inmovilizaron por adsorción pasiva en microplacas de poliestireno, y se opitimizaron las distintas variables del ensayo tipo elisa. Los dos ensayos desarrollados se evaluaron mediante el estudio de las constantes diagnósticas y analíticas y el estudio de las características analíticas. Para la elisa anti-ss-b (la), se obtuvieron los siguientes resultados: sensibilidad diagnóstica del 96%, especificidad diagnóstica del 97%, coeficiente de repetibilidad del 2,1%, coeficiente de reproductibilidad del 10,0%, y ausencia de reacciones cruzadas e interferencias. Para la elisa anti-ss-a (ro) los resultados fueron los s
Datos académicos de la tesis doctoral «Preparación de antígenos recombinantes para la detección de autoanticuerpos mediante enzimoinmunoanálisis en el síndrome de sjÁ¶gren«
- Título de la tesis: Preparación de antígenos recombinantes para la detección de autoanticuerpos mediante enzimoinmunoanálisis en el síndrome de sjÁ¶gren
- Autor: Marc Bruguera Vilalta
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 21/02/2002
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Petraki Munujos Vinyoles
- Tribunal
- Presidente del tribunal: francesc González sastre
- Manuel Santamaria ossorio (vocal)
- Antonio Elduque terron (vocal)
- Martínez mas joan vicení§ (vocal)