Tesis doctoral de Margarita Mercadal Pujiula
Se prepararon inmunoliposomas convencionales (il), por el método de unión del spdp y utilizando el anticuerpo monoclonal my10 dirigido contra el antígeno cd34, el cual se expresa en células hematopoyéticas progenitoras. variando la relación anticuerpo/lípido se obtubieron il con diferentes densidades de anticuerpo. Estos reconocían específicamente las células cd34+. La eficiencia de unión se incrementaba aumentando la concentración lipídica o la densidad de anticuerpo de trabajo. La estabilización estérica de los il se llevó a cabo incluyendo en la composición lipídica peg(2000) pe y pdp-peg(3400)pe hasta un 5% final de peg. La diferente longitud de las cadenas de polímero no alteraba la estabilidad estérica de los liposomas y permitía obtener eficiencias de unión del anticuerpo mejores que las obtenidas hasta el momento. los inmunoliposomas estabilizados estéricamente (sil) preparados mediante el reactivo smpb (enlace tioéter, eficiencia=100%) son útiles para aplicaciones in vivo, mientras que el reactivo spdp (puente disulfuro, eficiencia del 70%) es adecuado para la preparación de sil para la selección ex vivo de células cd34+. Los sil se unen especificamente a células cd34+ presentes en bajos porcentajes, sin afectar a la viabilidad celular. para la selección celular magnética, se encapsuló en liposomas dos tipos de ferrofluidos, uno estabilizado con dextrano (ff- dt) y otro con citrato (ff-ct). Los inmunomagnetoliposomas se unían a las células kg-la, pero tenían una elevada unión inespecífica, la cual aumentaba al incrementarse la concentración lipídica de trabajo. La eficiencia de captura de los inmunomagnetoliposomas con ff-ct (90%) fue superior a la de los que contenían ff-dt (19%). La pureza obtenida era dependiente del porcentaje inicial de células cd34+ y de la línea celular utilizada como cd34-. Por ello, este sistema tiene limitada su aplicación.
Datos académicos de la tesis doctoral «Preparacion de inmunoliposomas anti-cd34. aplicacion a la seleccion celular.«
- Título de la tesis: Preparacion de inmunoliposomas anti-cd34. aplicacion a la seleccion celular.
- Autor: Margarita Mercadal Pujiula
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 22/07/1998
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Juan Carles Domingo Pedrol
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José manuel Gonzalez ros
- montserrat Gallardo sauret (vocal)
- félix Rueda palacio (vocal)
- josep oriol Masso barnadas (vocal)