Tesis doctoral de Gemma Gubern Olivella
El objetivo del trabajo era la preparacion y certificacion de un material de referencia de la amilasa incluido en el programa del community bureau of reference. Este material permitira armonizar las mediciones de la concentracion catalitica de la amilasa en los laboratorios europeos. Se purificaron 30 mg de amilasa con una actividad especifica de 52,9 ku/g a partir de pancreas humano. La masa molecular relativa de la enzima purificada era de 57800 con un punto isoelectrico de 7,1. Se selecciono una matriz en la que la enzima fuese estable. Se preparo el material de referencia diluyendolo en la matriz que contenia tampon pipes 25 mmol/l, ph 7,0, nacl 50 mmol/l, edta 0,5 mmol/l, cacl2 1,5 mmol/l y albumina humana 30 g/l y se liofilizo. el material de referencia era homogeneo y conmutable con el enzima presente en suero humano. La perdida anual de actividad catalitica se estimo en 0% a -20 grados c. Al no existir metodo de referencia, se selecciono el metodo que usa como sustrato 2-cloro-4-nitrofenil-maltotriosido para la asignacion del valor al material de referencia. se optimizo este metodo de medida. El valor certificado a 37 grados c de concentracion catalitica obtenido en un estudio interlaboratorio corresponde a 555 u/l +- o u/l o 9,25 kat/l+- o,17 kat/l.
Datos académicos de la tesis doctoral «Preparacion de un material de referencia europeo de alfa-amilasa pancreatica humana«
- Título de la tesis: Preparacion de un material de referencia europeo de alfa-amilasa pancreatica humana
- Autor: Gemma Gubern Olivella
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1995
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Gella Tomas Francisco Javier
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Francesc González Sastre
- Joan Guinovart Cirera (vocal)
- José Carreras Barnés (vocal)
- Rosa Segura Cardona (vocal)