Tesis doctoral de Inmaculada Farran Blanch
La albumina humana (hsa)es la proteina serica mas utilizada en el mundo, estimandose unas necesidades mundiales de aproximadamente 500 toneladas por año. La albumina comercial se obtiene basicamente de plasma humano, por lo que la produccion de albumina recombinante es muy atractiva, tanto para eliminar el riesgo de trasmision de enfermedades, como para reducir el consumo de sangre procedente de bancos. La produccion de proteinas recombinantes en plantas transgenicas ofrece una gran flexibilidad en cuanto al tamaño de produccion, asi como unos costes de implantacion bajos. Ademas, presenta ventajas como el procesamiento eucariotico de la proteina recombinante y la bioseguridad. para expresar albumina humana en tuberculos de plantas transgenicas de patata, la estrategia seguida consistio en producir la secuenica del cdna de la hsa madura y clonarla bajo el control transcripcional de un promotor especifico de tuberculo (promotor b33 de patatina). El extremo amino de la albumina recombinante se fusionó a un péptido señal tambien de tubérculo (inhibidor de proteasa ii), para que se procese correctamente dicha fusion in vivo y de lugar a la albúmina recombinante madura. la transformacion se realizo mediante agrobacterium tumefaciens a partir de hojas de patata cv. Desiree, kennebec y pasc58, y se verificó la inserción del transgen mediante screening por pcr y southern. La expresion del mismo se analizó mediante northern blot en tubérculos procedentes de plantas cultivadas en invernadero. Los niveles de produccion de albumina recombinante se analizaron mediante western blot, y se cuantificaron por elisa. Los valores máximos de albumina recombinante acumulada en los tuberculos de dichas transgenicas fueron la albumina humana. Se demostro la localizacion apoplastica de la hsar en hojas de plantas transgenicas de patata, induciendo su expresión con sacarosa. Asi mismo, la albumina recombinante producida en tuberculos se purifico me
Datos académicos de la tesis doctoral «Produccion de albumina humana en tuberculos de plantas transgenicas de patata (solanum tuberosum l.)«
- Título de la tesis: Produccion de albumina humana en tuberculos de plantas transgenicas de patata (solanum tuberosum l.)
- Autor: Inmaculada Farran Blanch
- Universidad: Pública de navarra
- Fecha de lectura de la tesis: 05/02/2001
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Angel Mingo Castel
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Jesús m. Prieto valtueña
- ricardo Ordas fernandez (vocal)
- José Sanchez serrano (vocal)
- enrique Ritter azpitarte (vocal)