Tesis doctoral de Joaquim Vives Armengol
Ante la imposibilidad económica y física de controlar ingenierilmente todos los parámetros involucrados en la pérdida de viabilidad de los cultivos in vitro de células animales ya sea debido a limitación en el subministro de nutrientes, así como por la presencia de elevadas concentraciones de subproductos tóxicos del metabolismo, en este trabajo se ha explorado tanto la modificación de la formulación del medio de cultivo como genética de células de hibridoma con el objetivo de prolongar la supervivencia dentro de los bioreactores y rendibilizar el proceso de obtención de anticuerpos monoclonales. la reformulación del medio permitió relantizar la proliferación celular y retardar el agotamiento de nutrientes esenciales. De todas formas, estos cambios favorecieron la inducción de la muerte celular por apoptosis. el bloqueo de la apoptosis mediante el uso de inhibidores peptídicos específicos de caspasas permitió no sólo retardar la pérdida de viabilidad de los cultivos si no también recuperarlos 36 horas después de haber inducido la muerte por falta de glutamina. resultados similares se obtuvieron en la inhibición genética de la activación de la ruta bioquímica de las caspasas mediante la sobreexpresión de genes protectores de la familia de bcl-2, tanto de origen endógeno como vírico. además, los cultivos de estas nuevas líneas celulares de hibridoma pueden ser recuperadas después de haber sido sometidas hasta 48 horas bajo condiciones inductoras de la apoptosis. estos resultados demuestran la viabilidad de la incorporación de una válbula de seguridad genética que permite retardar el proceso de muerte por apoptosis de células que, en otras circunstancias, morirían y se acumularían en el bioreactor. Además, la sobreexpressión de genes antiapoptóticos hace a las células más resistentes y permite recuperar cultivos que, por causas accidentales inherentes a la metodología utilizada en el monit
Datos académicos de la tesis doctoral «Protección del proceso de muerte celular programada en cultivos in vitro de células animales«
- Título de la tesis: Protección del proceso de muerte celular programada en cultivos in vitro de células animales
- Autor: Joaquim Vives Armengol
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 15/02/2002
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Luis Cornudella Mir
- Tribunal
- Presidente del tribunal: francesc Godia casablancas
- jacint Boix torras (vocal)
- José vicente Castells ripoll (vocal)
- í ngels Sierra jiménez (vocal)