Purificacion y caracterizacion de diferentes formas mutantes de la citotoxina alfa-sarcina.

Tesis doctoral de Lacadena Garcia Gallo Francisco Javier

La alfa-sarcina es una proteina producida por el hongo aspergillus giganteus mdh 18894, perteneciente a un grupo de ribotoxinas fungicas que se caracterizan por su caracter citotoxico, debido a su actividad ribonucleolitica. El cdna de esta proteina se ha clonado en diferentes sistemas de expresion permitiendo la purificacion de alfa-sarcina recombinante, estructural y enzimaticamente indistinguible de la fungica. Este sistema de expresion ha permitido la produccion de grandes cantidades de formas marcadas uniforme y selectivamente (tyr y phe) con n15 y c13, aspecto este imprescindible para la resolucion de la estructura tridimensional de la proteina. Se han purificado y caracterizado diferentes formas mutantes de la alfa-sarcina, en residuos pertenecientes al centro activo de la proteina. Esto ha podido confirmar la participacion de las his50 y 137 en el mantenimiento de la actividad ribonucleolitica de esta proteina inactivante de ribosomas. por otro lado, mutaciones en la cys76 y 132 implican una mayor dificultad en su purificacion y su caracterizacion sugiere el mantenimiento de su capacidad para interaccionar con bicapas lipidicas.

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Purificacion y caracterizacion de diferentes formas mutantes de la citotoxina alfa-sarcina.«

  • Título de la tesis:  Purificacion y caracterizacion de diferentes formas mutantes de la citotoxina alfa-sarcina.
  • Autor:  Lacadena Garcia Gallo Francisco Javier
  • Universidad:  Complutense de Madrid
  • Fecha de lectura de la tesis:  01/01/1997

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Alvaro Martinez Del Pozo
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: José Gregorio Gavilanes Franco
    • Barbero Esteban José Luis (vocal)
    • Mercedes Oñaderra Sanchez (vocal)
    • José Luis Garcia Lopez (vocal)

 

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