Tesis doctoral de Martinez Costa Oscar Hernan
Se ha purificado a homogeneidad la fosfofructokinasa de dictyostelium discoideum unas 15.000 veces, con un rendimiento del 29% y una actividad especifica de 83,5 u/mg. El enzima nativo es un homotetramero de 380 kda de peso molecular constituido por subunidades de 95 kda, el punto isoelectrico estimado es de 6,78 y se ha determinado su composicion de aminoacidos. Un anticuerpo contra la proteina desnaturalizada obtenido en conejos inmunoprecipita la actividad fosfofructokinasa y no reconoce al enzima de musculo y levadura. El ph optimo es de 7,4. En contra de lo que ocurre con la mayoria de las fosfofructokinasas la curva de saturacion para fructosa-6-p y atp es hiperbolica con valores de km de 22 m y 7,1 m, respectivamente. Apenas se inhibe por atp; no es sensible a los efectores alostericos tipicos de este enzima en otras celulas ni se afecta por concentracion de enzima. Su actividad no se modifica por la proteina kinasa dependiente de camp; ni varia durante las primeras horas del desarrollo. Podemos concluir que se trata de una fosfofructokinasa unica entre las conocidas que solo presenta como mecanismo de control la respuesta a concentracion de sustrato. esta actividad se localiza en la fraccion citosolica. Se han identificado tambien una posible forma isoenzimatica de conducta cinetica similar, pero que difiere en diversas caracterizticas fisicoquimicas e inmunologicas.
Datos académicos de la tesis doctoral «Purificacion y caracterizacion de la fosfofructokinasa de dictyostelium discoideum.«
- Título de la tesis: Purificacion y caracterizacion de la fosfofructokinasa de dictyostelium discoideum.
- Autor: Martinez Costa Oscar Hernan
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 01/01/1991
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Juan José Aragón Reyes
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Antonio Sillero Repullo
- Manuel Martin Lomas (vocal)
- Monserrat Pinilla Barran (vocal)
- Francisco García Blanco (vocal)