Reconstitucion in vivo e in vitro de los procesos de transcripcion-replicacion del virus de la gripe a partir de genes clonados: analisis mutacional de la subunidad pb2 de la polimerasa viral.

Tesis doctoral de Beatriz Perales Eceiza

Se ha reconstituído in vivo un sistema para la transcripción-replicación del virus de la gripe a partir de genes clonados. Este abordaje experimental permite la detección de todos los tipos de rna del virus: mrna crna y vrna. utilizando este sistema se ha demostrado que la subunidad pb2 de la rna polimerasa del virus de la gripe se requiere para la replicación del rna viral, tanto en el primer paso (síntesis de crna a partir de un vrna molde) como en el segundo (síntesis de vrna a partir de un crna molde). se ha reconstituído un sistema in vitro que es capaz de generar crna y mrna virales a partir de extractos nucleares de células transfectadas con los genes virales clonados. Al igual que en el sistema in vivo, en este sistema la subunidad pb2 es necesaria para la replicación del rna viral. el análisis mutacional de la subunidad pb2 ha confirmado que el determinante principal de la nls de pb2 se localiza en el extremo c-terminal de la proteína y que además se requieren otras secuencias internas para que tenga lugar un transporte eficiente. Además se ha definido la región n terminal de pb2 como necesaria y suficiente para la interacción con el complejo de la polimerasa. Algunas mutaciones en diversas posiciones de la molécula afectan a la localización nuclear de la proteína, otras alteran su interacción con el complejo transcripcional y otras inhiben su actividad biológica. de interés especial son los mutantes de inserción que muestran un fenotipo ts o son defectivos en actividad de unión a cap.

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Reconstitucion in vivo e in vitro de los procesos de transcripcion-replicacion del virus de la gripe a partir de genes clonados: analisis mutacional de la subunidad pb2 de la polimerasa viral.«

  • Título de la tesis:  Reconstitucion in vivo e in vitro de los procesos de transcripcion-replicacion del virus de la gripe a partir de genes clonados: analisis mutacional de la subunidad pb2 de la polimerasa viral.
  • Autor:  Beatriz Perales Eceiza
  • Universidad:  Autónoma de Madrid
  • Fecha de lectura de la tesis:  04/12/1997

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Juan Ortin Monton
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: Juan Antonio Garcia alvarez
    • amparo Cano garcia (vocal)
    • Mª rosa Esteban cañibano (vocal)
    • Rafael Garesse alarcón (vocal)

 

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