Tesis doctoral de Manuel Manchado Campaña
Escherichia coli posee distintos regulones de defensa frente a situaciones de estrés. Mediante rt-pcr multiple se ha estudiado la regulación transcripcional de 17 genes, miembros de los regulones oxyr, soxr/s, rpos y mara, en distintas condiciones de crecimiento y frente a diversos agentes estresantes (h2o2, paraquat, salicilato o nac1). Se ha establecido la necesidad de fijar las condiciones de amplificacion mediante rt-pcr tipos c y t y la de incluir un estandar externo que monitorice posibles variaciones en la expresion del estandar interno o en control. el crecimiento en medio nutritivo lb induce la transcripcion de los miembros del regulon oxyr (oxyr, katg,dps, gora y ahpcf). La osmolaridad de este medio podria explicar dicha induccion, al no detectarse esta en medio minimo pero si en respuesta a estrés con nac1. el h2o2, a dosis bajas (10 um), induce el regulon oxyr y a concentraciones moderadas (100 um) el regulon soxr/s. Ambas inducciones son totalmente dependiente de los reguladores especificos (oxyr o soxr, respectivamente). el regulon soxr/s(soxs, micf, tolc y mara) responde tambien a paraquat, salicilato y nac1. En todos los casos es una respuesta especifica dependiente de soxr. la transcripcion del rob, homologo de soxs y mara, se reprime en respuesta a paraquat y salicilato, lo que explicaria el funcionamiento de ambos regulones en presencia de altos niveles basales de la proteina rob. el regulon rpos(rpos, kate y osmy) no se induce con oxidantes (h2o2 o parquat) pero si con salicilato (estrés acido) y nac1(estrés osmotico).
Datos académicos de la tesis doctoral «Respuesta bacteriana al estrés oxidativo: cuantificacion de la expresion genica in vivo mediante retrotranscripcion y pcr multiple«
- Título de la tesis: Respuesta bacteriana al estrés oxidativo: cuantificacion de la expresion genica in vivo mediante retrotranscripcion y pcr multiple
- Autor: Manuel Manchado Campaña
- Universidad: Córdoba
- Fecha de lectura de la tesis: 15/12/2000
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Carmen Pueyo De La Cuesta
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Juan anselmo Perea remujo
- josep Casadesus pursals (vocal)
- silvia Marques martin (vocal)
- Emilio Fernandez reyes (vocal)