Tesis doctoral de Gregorio Galvez Valdivieso
En este trabajo es estudian distintos aspectos fisiológicos y moleculares de la regulación de la síntesis de alfa-tocoferol en el alga unicelular chlamydomonas reinhardtii. Para ello , se han clonado y caracterizado los genes hppd1 y tmt1 de c. Reinhardtii, genes que codifican la p-hidroxifenilpiruvato dioxigenasa (hppd) y la gamma-tocoferol metiltransferasa (gamma-tmt), primera y última enzima de la ruta de síntesis de alfa-tocoferol. La clanación de hppd1 en un vector de expresión ha permitido purificar dicha enzima en forma de proteína del fusión y su caracterización dísico-química y cinética. la enzima tiene una masa molecular de 47 kda y en condiciones nativas, se organiza en tetrámeros de subunidades del mismo tamaño no uniddas entre sí por puentes disulfuro.Se ha estudiado el papel que la temperatura y la luz tienen sobre la regulación de la acumulación y síntesis de alfa, beta, y gamma-tocoferon en c.Reinhardtii. La determinación mediante hplc de la acumulación de los distintos tocoferoles y el análisis mediante northern-blot de los genes hppd1 ytmt1 revelan que a baja temperatura se acumula específicamente gamma-tocoferol, mientras que a temperaturas superiores se acumulan alfa-tocoferol. ninguno de os tocoferoles varió significativamente tras exponer las células a una irradiancia mayor ni tras someterlas a oscuridad; sin embargo dichas condiciones , sí que se afectó la expresión de happd1 y tmt1. La respuesta diferencial en la acumulación de alfa y gamma-tocoferol ante la variación de dichos parámetros ambientales , unido a las diferentes propiedades estructurales y físico-químicas , sugiere que alfa y gamma-tocoferol realizan funciones diferentes, bien debido a una localización diferente o a que participan en procesos distintos. Finalmente , se han transformado células de c.Reinhardtii con una construcción que contine el gen hppd1 bajo el cotrol de promotor 35s.Los resultados preliminares
Datos académicos de la tesis doctoral «Síntesis de alfa-tocoferol en el alga unicelular chlamydomonas reinhardtii: aspectos fisiológicos y moleculares.«
- Título de la tesis: Síntesis de alfa-tocoferol en el alga unicelular chlamydomonas reinhardtii: aspectos fisiológicos y moleculares.
- Autor: Gregorio Galvez Valdivieso
- Universidad: Córdoba
- Fecha de lectura de la tesis: 08/04/2005
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Manuel Pineda Priego
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Jesús Díez dapena
- ester Perez lorences (vocal)
- enriqueta Moyano cañete (vocal)
- José Antonio Gonzalez reyes (vocal)