Tesis doctoral de Noureddine Loukili
Nuestros objetivos en esta tesis han sido: 1,- estudiar la función de la proteína uev1, un nuevo regulador de poliubiquitinación encontrado en la búsqueda de nuevos genes implicados en el control de la diferenciación y la proliferación celular. 2,- analizar la arquitectura genómica del gen para uev1. 3,- establecer un análisis comparativo de estos genes y proteínas, incluyendo estudios filogenéticos y evolutivos. mediante diferencial display (rap) con rna de una línea celular th29 m6 de cáncer de colon hemos identificado una nueva familia de proteínas altamente conservadas en todos los eucariotas que son variantes de los enzimas de conjugación de ubiquitinas y que no posen el centro catalítico intrínseco de estas. A estas proteínas las hemos denominado uev. Hemos demostrado que la proteína uev por si sola no promueve la conjugación de la ubiquitina. hemos encontrado al menos tres isoformas para este transcrito y que este transcrito mediante secuenciación y comparación con datos genomicos hemos deducido que estas 3 isoformas se deben a un splicing alternativo. mediante fish utilizando clones pac que contienen el gen uev1 hemos podido localizar este gen uev1 en el cromosoma 20q13.2. desde el punto de vista funcional hemos observado mediante citometria de flujo que células m6 transfectadas para una expresión constitutiva del uev1 presentan una mayor acumulación en fase s y g2m. además de la alta proporción de células en fase s y g2m que en el control hemos observado una acumulación de células multinucleadas y que aumenta en proporción con el tiempo de cultivo. también hemos detectado un 3% de células apoptóticas que no existen en el control. hemos visto que el menos parte de este fenotipo se asocia a una inhibición de la actividad de la kinasa mitotica cdk1. hemos demostrado la presencia de un nuevo gen, que hemos llamado kua, en el mismo locus que uev. hemos demostrado que, en huma
Datos académicos de la tesis doctoral «Studies on uev, a new regulator of polyubiquitination: functional aspects and genomic analysis«
- Título de la tesis: Studies on uev, a new regulator of polyubiquitination: functional aspects and genomic analysis
- Autor: Noureddine Loukili
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 28/05/2002
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Timothy Thomson Okatsu
- Tribunal
- Presidente del tribunal: cristóbal Mezquita plá
- Carlos Ciudad gómez (vocal)
- José Luis Rosa lopez (vocal)
- gabriel Gil gómez (vocal)