Tesis doctoral de Emma Gasol Escuer
La familia de transportadores heteroméricos de aminoácidos pose la característica única de estar compuestos por dos subunidades: una subunidad pesada y una subunidad ligera unidas por un puente disulfuro. Mutaciones en alguno de sus miembros son responsables de aminoacidurias hereditarias, como la lisinuria con intolerancia a proteínas (lpi) o la cistinuria. al inicio de esta tesis, nos propusimos identificar alguna nueva subunidad ligera humana de esta familia. Mediante búsqueda por homología de secuencia se donó el cdna correspondiente a una nueva proteína altamente homóloga a una proteína de ratón asociada al sistema de transporte xc-. La caracterización funcional confirmó que xct humano, en combinación con 4f2hc, induce una actividad de transporte de cistina y glutamato, con sodio-independencia (sistema xc-). Los perfiles de captación de los sustratos en función del ph del medio de transporte indican que tanto el l-glutamato como la l-cistina son transportados de forma aniónica, cada uno con una carga negativa neta. por experimentos de salida de sustrato se determinó el carácter intercambiador de este transportador, con una estequiometría de 1:1.El patrón de expresión de xct humano por northem blot muestra una ligera banda presente únicamente en cerebro. Experimentos de rt-pcr también resultaron positivos para los islotes pancreáticos y líneas celulares correspondientes a línias epiteliales y tumorales, mientras riñón e hígado no mostraron ninguna señal. El papel fisiológico de xct parece estar implicado en la captación de cistina para la síntesis de glutatión y su mantenimiento, dándole un papel relevante en situaciones de estrés oxidativo. a continuación se abordó la determinación de la topología de xct como modelo de subunidad ligera. Experimentos de inmunodetección evidencian la localización intracelular de los dos extremos de la proteína. Utilizando la estrategia de introd
Datos académicos de la tesis doctoral «Transportador de aminoácidos heteromérico xct: identificación, caracterización funcional y topología«
- Título de la tesis: Transportador de aminoácidos heteromérico xct: identificación, caracterización funcional y topología
- Autor: Emma Gasol Escuer
- Universidad: Barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 21/10/2004
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Manuel Palacín Prieto
- Tribunal
- Presidente del tribunal: marí§al Pastor anglada
- beatriz López corcuera (vocal)
- ignasi Fita (vocal)
- dimitrios Fotiadis (vocal)