Tesis doctoral de Núria Camats Tarruella
Inestabilidad cromosómica transgeneracional y radioprotección en rata núria camats tarruella esta tesis presenta por primera vez un análisis exhaustivo y sistematizado de las células somáticas de la descendencia de hembras adultas de la especie rattus norvegicus con la finalidad de: 1.- Analizar los efectos de las radiaciones ionizantes en la descendencia de hembras de rata irradiadas. ¿existe de daño citogenético en la línea germinal de ratas hembra inducido por las radiaciones ionizantes? ¿las radiaciones ionizantes provocan efectos transgeneracionales? ¿existe disfunción ovárica (efectos reproductivos) en ratas hembra inducida por las radiaciones ionizantes? ¿las radiaciones ionizantes determinan problemas reproductivos? 2.- Estudiar la posible interacción de los efectos citogenéticos de las radiaciones ionizantes con los efectos de un mutágeno químico (afidicolina). ¿presentan efectos aditivos los posibles efectos transgeneracionales de las radiaciones ionizantes cuando su descendencia se somete a un mutágeno químico? 3.- Conocer la posible modulación de los efectos radioinducidos, tanto citogenéticos como reproductivos, por parte de un análogo agonista de la hormona liberadora de gonadotropinas (triptorelina). ¿existe radioprotección por un análogo agonista de la hormona liberadora de gonadotropinas (gnrha) frente los efectos de las radiaciones ionizantes? ¿son radioresistentes los ovarios prepuberales? ¿cómo es la modulación del daño radioinducido? ¿existe modulación en esta posible radioresistencia? 4.- Caracterizar las bandas cromosómicas implicadas en las alteraciones cromosómicas radioinducidas y relacionarlas con otras regiones cromosómicas inestables de la especie: las bandas cromosómicas afectadas por un mutágeno químico (afidicolina), los lugares frágiles y las secuencias teloméricas intersticiales. ¿existen regiones genómicamente inestables en la arquitectura cromosómica de rattus norvegicus? ¿si las hubiese, tendrían algún tipo de memoria evolutiva? a partir de todos estos estudios en células somáticas provenientes de fetos de hembras irradiadas de la especie rattus norvegicus, se ha demostrado que existe una inestabilidad cromosómica radioinducida transgeneracional (rici). ésta se considera consecuencia importante de las radiaciones ionizantes en los ovocitos i de estas hembras y se observa en los fibroblastos fetales provenientes de la fecundación de los folículos primordiales irradiados. Esta rici se ha medido y determinado por diferentes frecuencias de alteraciones cromosómicas estructurales, que incluyen tanto las discontinuidades como las reorganizaciones de la secuencia del dna. des de un punto de vista citogenético, también se ha demostrado que los efectos de las radiaciones ionizantes en la siguiente generación de individuos ocurren tanto en la administración aguda de la radiación (dosis de 5 gy) como en la fraccionada (dosis de 12 gy). No obstante, los resultados son similares en los dos grupos de tratamiento aunque provienen de dosis y tipos de administración de radiación diferentes, como si la administración fraccionada provocara un daño similar a la aguda. Esto hace pensar que los efectos relacionados con el tipo de administración predominan en relación con el efecto de la dosis. En cuanto al estudio reproductivo, no se observa un efecto de la radiación con los parámetros estudiados. en el ámbito basal, existe una inestabilidad cromosómica espontánea observada tanto en los parámetros citogenéticos cuantitativos como en los cuantitativos. Esta inestabilidad cromosómica espontánea se mantiene constante en los diferentes trabajos presentados. La presencia de una inestabilidad cromosómica equivalente también se ha observado anteriormente en células fetales de la especie humana. consideramos de interés el hallazgo de un efecto protector gnrha frente a la inestabilidad cromosómica espontánea, que se traduciría en una mejora de la función gonadal. Esta mejora es evidente en cuanto a los parámetros citogenéticos estudiados y se observa como una tendencia a la mejora en cuanto a las condiciones reproductivas de las hembras. esta tesis ha demostrado que el gnrha estudiado (la triptorelina) confiere radioprotección a los ovocitos i de los folículos primordiales de las ratas adultas, aunque el grado de protección depende del parámetro de análisis utilizado, citogenético o reproductivo, y también de la dosis y del tipo de administración de las radiaciones ionizantes. Cabe destacar que los parámetros citogenéticos indican que la radioprotección de este gnrha es mucho más pronunciada a dosis aguda. des de finales del siglo xx, se ha demostrado que un estado prepuberal de las gónadas, tanto masculinas como femeninas, las harían menos sensibles a lesiones por agentes citotóxicos. Por lo tanto, se postuló que si se conseguía inducir un estado quiescente de los ovarios, se protegerían las gónadas. Esto es justamente lo que hace una administración continuada de la triptorelina. Este gnrha induce una parada del eje hormonal hipotálamo-hipófisis-ovario, produciendo unas condiciones hormonales parecidas a las de las niñas prepuberales. la presente tesis confirma estudios histológicos anteriores referentes a los efectos radioprotectores de gnrhas en rata, estudios clínicos hechos en niñas prepuberales y en pacientes adultas, y también otros estudios clínicos hechos en pacientes tratadas y en no tratadas con gnrhas y sometidos a radioterapia. Nuestros resultados en rata indicarían que los ovarios prepuberales y los ovarios de pacientes adultas tratadas con gnrhas son más radioresistentes que los ovarios de pacientes adultas no tratadas con el análogo. los efectos directos del mutágenos químico utilizado (afidicolina) sobre los fibroblastos fetales han resultado importantes des de un punto de vista citogenético. Estos efectos directos son claramente superiores cuando el mutágeno químico se aplica a células con rici trangeneracional, lo que indica que la rici potenciaría claramente los efectos de la afidicolina. Nuestros resultado en hembra van en el mismo sentido que los observados en otros trabajos de rata macho y en ratones hembra. la especie rattus norvegicus presenta un gran número de secuencias teloméricas intersitciales distribuidas a lo largo de todo su genoma. De estos, un 14 % (17 de 121) se consideran frecuentes. Destaca el hecho que esta especie no presente secuencias de este tipo en bloques, típicas de roedores. Durante el estudio exhaustivo de las bandas cromosómicas se ha observado que como mínimo una parte de estas secuencias están implicadas en eventos evolutivos, de inestabilidad cromosómica espontánea y radioinducida transgeneracional y también en los efectos de la afidicolina. se han identificado los lugares frágiles en fibroblastos fetales inducidos por la afidicolina. En la mayoría de los casos hay coincidencia con lugares frágiles de otras especies estudiadas y también con otros eventos inestables y evolutivos. des de un punto de vista cualitativo, se ha determinado que las bandas cromosómicas en rata no se rompen al azar, sino que existen regiones que sufren más alteraciones cromosómicas que otras y, por lo tanto, que son más inestables. Se han caracterizado los cromosomas y las bandas cromosómicamente inestables del cariotipo de rattus norvegicus en cuanto a las alteraciones cromosómicas radioinducidas y espontáneas y se han relacionado con otras bandas cromosómicamente inestables de la especie. los cromosomas más largos (rno1, rno2 y rno3) son los que contienen significativamente más regiones inestables, tanto en cuanto a los efectos del mutágeno químico afidicolina, a la inestabilidad cromosómica espontánea, a los lugares frágiles y a las secuencias teloméricas intersticiales de la especie rattus norvegicus. Además, en muchas ocasiones, las regiones inestables caracterizadas a lo largo de todo el cariotipo de esta especie coinciden con lugares frágiles y con secuencias teloméricas intersticiales de otras especies de mamíferos (primates). Todo esto indica que existen regiones en el cariotipo de rata en que la fragilidad es muy destacada, ya sea por causa de su secuencia, de la conformación tridimensional o por razones desconocidas. Esta inestabilidad se mantiene tanto en el agente físico (radiaciones) como en el químico (afidicolina) y se conserva entre especies y, en consecuencia, a lo largo de la evolución de los mamíferos.
Datos académicos de la tesis doctoral «Inestabilitat cromosómica transgeneracional i radioprotecció en rata«
- Título de la tesis: Inestabilitat cromosómica transgeneracional i radioprotecció en rata
- Autor: Núria Camats Tarruella
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 20/03/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Francisca García Haro
- Tribunal
- Presidente del tribunal: carme Fuster marqués
- Juan José Espinós gómez (vocal)
- (vocal)
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