Tesis doctoral de Elisa De Castro Alvarez
La replicación del dna en eucariotas es un proceso preciso y coordinado que permite que todo el genoma se duplique durante la fase s del ciclo celular y se transmita a la siguiente generación intacto. La replicación tiene lugar tanto durante la fase s mitótica como en la fase s premeiótica y requiere el ensamblaje del complejo de reconocimiento del origen (orc) en múltiples sitios del genoma denominados orígenes de replicación (kong & depamphilis, 2001). durante la meiosis la recombinación se inicia a partir de roturas de doble cadena (dsbs) generadas tras la replicación (cervantes et al, 2000). La reparación de estas roturas genera crossovers que permiten la correcta segregación de los cromosomas homólogos y la generación de diversidad en la progenie. Los dsbs son generados en todos los eucariotas estudiados por la proteína spo11 (rec12 en s. Pombe) por un mecanismo de transesterificación tipo topoisomerasa (keeney et al, 1997). Tanto los eventos de recombinación como la formación de las roturas se producen en sitios específicos del genoma llamados hotspots de recombinación. Se ha comprobado que la mayoría de los hotspots en s. Pombe se sitúan en regiones intergénicas excepcionalmente largas de los cromosomas (cromie et al, 2007). mediante electroforesis bidimensional y southern blot hemos demostrado que existe un 60% de colocalización entre los orígenes de replicación y los sitios de dsbs. Sin embargo tras varias inserciones y deleciones en dos loci diferentes del genoma, comprobamos que dicha colocalización no implica una dependencia funcional entre ambos procesos. también estudiamos cuáles eran los requerimientos necesarios para la generación de dsbs integrando diferentes secuencias en dos loci genómicos y observamos que el alargamiento de una región intergénica corta carente de dsbs genera roturas independientes de la actividad de un origen de replicación adyacente o de la secuencia de la región integrada.
Datos académicos de la tesis doctoral «Organización genómica del inicio de la replicación y la recombinación en schizosaccharomyces pombe«
- Título de la tesis: Organización genómica del inicio de la replicación y la recombinación en schizosaccharomyces pombe
- Autor: Elisa De Castro Alvarez
- Universidad: Salamanca
- Fecha de lectura de la tesis: 25/01/2010
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Francisco Antequera Marquez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: andrés Aguilera lópez
- Juan Méndez zunzunegui (vocal)
- José Carlos Reyes rosa (vocal)
- mónica Segurado carrascal (vocal)