Tesis doctoral de Sergio Galaz Leiva
En este trabajo se han estudiado los efectos sobre la morfología y la adhesión celular de queratinocitos murinos en cultivo tras ser sometidos a tratamientos fotodinámicos, utilizando como fotosensibilizador (fs) la ftalocianina de zinc (znpc). la znpc es un fs de segunda generación, actualmente en fase ii de experimentación clínica, que ha demostrado ser un excelente compuesto para la fotoquimioterapia. sin embargo, los mecanismos por los cuales actúa dicho fs e induce la destrucción tumoral no están bien entendidos. como modelo para este estudio in vitro se han empleado queratinocitos de ratón pam-212, ya sea expresando resistencia a neomicina, (pam-neo) o sobre-expresenado el oncogen ras (v12h-ras; pam-ras), a los cuales se aplicaron tratamientos con znpc y luz roja en dosis letales (dl100) o subletales (dl50-60). los resultados muestran que la viabilidad celular de pam-neo y pam-ras no se ve afectada significativamente cuando son incubadas con znpc en ausencia de luz en cualquiera de las concentraciones utilizadas (2,5 x 10-7; 10-6; 2,5 x 10-6 m) y tiempos cortos (2h) pero sí a concentraciones altas (5 x 10-6m) y tiempos largos (18h). La viabilidad celular determinada en pam-neo y pam-ras mediante el ensayo del mtt, tras ser sometidas al tratamiento con elevadas concentraciones de znpc (5 x 10-6 m) y tiempos largos de irradiación con luz roja (15 minutos), provocaron la inactivación completa de ambos tipos celulares. Los cambios morfológicos observados en los cultivos analizados mediante tinción con azul de toluidina después de aplicar la dosis letal (dl100) fueron semejantes en los dos tipos celulares, pero notablemente diferentes a los encontrados con las dosis subletales, siendo especialmente notales a 24 y 48 h. El análisis morfológico nuclear con hoechst 33258, así como los resultados obtenidos por electroforesis de adn, muestran que la muerte tras el tratamiento letal es por necrosis, mientras que después
Datos académicos de la tesis doctoral «Alteraciones en la adhesión de queratinocitos en cultivo por terapia fotodinámica. respuesta diferencial inducida por h-ras«
- Título de la tesis: Alteraciones en la adhesión de queratinocitos en cultivo por terapia fotodinámica. respuesta diferencial inducida por h-ras
- Autor: Sergio Galaz Leiva
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 18/03/2004
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- María ángeles Juarranz De La Fuente
- Tribunal
- Presidente del tribunal: jose Fernandez piqueras
- Santiago Nonell marrugat (vocal)
- pilar González peramato (vocal)
- Javierfrancisco Regadera gonzález (vocal)