Análisis funcional y de expresión de la enterocina as-48 en enterococcus faecalis y transferencia a otras bacterias del ácido láctico

Tesis doctoral de Matilde Fernández Rodríguez

La enterocina as-48 es un péptido circular producido por enterococcus faecalis, que muestra un amplio espectro de acción frente a numerosas bacterias patógenas transmitidas por alimentos y alterantes de los mismos. En esta memoria se ha completado la caracterización de la región genética responsable del carácter as-48 clonada en pam401, que consta de los genes as-48abcc1dd1efgh, en la que as-48a es el gen estructural. La caracterización de los productos codificados por los cuatro últimos genes, obtenidamediante análisis fenotípico de los mutantes de inserción con el transposoón tn5 y la aplicación de programas informáticos de alta fiabilidad, ha permitido conocer que los genes as-48efgh codifican un transportador de tipo-abc implicado en al autoprotección frente a as-48. En este sistema de transporte se ha identificado la función de as-48g, en la que se encuentran los dominios de unión a atp y la de las proteínas as-48eh que presentan cuatro dominios de expansión en membrana, mientras la proteína as-48f podría aumentar la eficacia del transportador. el análisis de transcripción de la región as-48 realizado mediante northern blot, junto a los resultados derivados de los estudios de complementación en trans de los genes as-48abc en pam36e llevados a cabo, ha permitido concluir que la región as-48 se encuentra estructurada en dos operones de expresión constitutiva (as-48abc y as-48c1dd1efgh) aunque presentan promotores internos que permiten la expresión regulada de los genes as-48bc y as-48efgh. la región as-48 ha sido clonada en vectores propios bacterias del ácidoláctico (pll253-81 y pem76-81), pero ninguna de las nuevas construcciones obtenidas ha igualado la eficacia de pam401-81 en la expresión y resistencia frente a as-48. La transferencia de la región as-48 a cepas de interés biotecnológico, ha sido realizada con éxito en lactococcus, lactobacillus y e.Faecium. Las dos primeras sólo mostraron una débil expresión de la re

 

Datos académicos de la tesis doctoral «Análisis funcional y de expresión de la enterocina as-48 en enterococcus faecalis y transferencia a otras bacterias del ácido láctico«

  • Título de la tesis:  Análisis funcional y de expresión de la enterocina as-48 en enterococcus faecalis y transferencia a otras bacterias del ácido láctico
  • Autor:  Matilde Fernández Rodríguez
  • Universidad:  Granada
  • Fecha de lectura de la tesis:  16/07/2004

 

Dirección y tribunal

  • Director de la tesis
    • Mercedes Maqueda Abreu
  • Tribunal
    • Presidente del tribunal: Francisco Gamarro conde
    • Martín martín m. cruz (vocal)
    • fernanda Ruíz larrea (vocal)
    • Fernández escamilla Ana m. (vocal)

 

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