Tesis doctoral de Beatriz Jiménez Garrido
La presente tesis muestra la potencialidad de la resonancia magnética nuclear (rmn) aplicada a sistemas paramagnéticos a la hora de determinar propiedades estructurales, moleculares y dinámicas de los sistemas de estudio. La rmn pramagnética era tradicionalmente evitada por la pérdida de información en las proximidades del entorno metálico. En esta tesi sse demuestra, sin embargo, que el paramagnetismo en rmn proporciona datos estructurales (derivados de las velocidades de relajación, de los desplazamientos de pseudocontacto y de los acoplamientos dipolares residuales) que compensan y superan la pérdida de información por relajación. los sistemas de estudio han sido la proteína azul de cobre (bcp) rusticianina (rc) y la proteína activadora de calcio calbindina d9k (cb). Rc es la bcp con el mayor potencial redoz (680 mv), siendo, asimismo, muy estable a valores de ph extremadamente ácidos. Hemos caracterizado la interacción del metal con sus ligandos mediante estudios de rmn paramagnética tanto del sistema nativo, cu(ii), como del derviado de cobalto(ii). La estructura electrónica del ion cobre viene determinada por la interacción de éste con los ligandos histidina, mientras que la interacción del cobre con los ligandos cisteína y metionina es debido al plegamiento global y en las proximidades del entorno metálico de la proteína. La interacción cu-sgammacys es tanto más fuerte cuanto más cerca está el ion metálico del plano nhisnhisscys formado por los átomos dadores de los ligando ecuatoriales. El estudio de mutantes de rc en la metionina axial revela que aquellos aminoácidos que proporcionan al cobre una geometría más tetraédrica (mutantes de glutamina, glutamato y cisteína) desplazan al cobre de ese plano y disminuyen la velocidad de autotransferencia electrónica. Mutantes en esta metionina que obligan al cobre a permanecer en dicho plano (leucina) favorecen la velocidad de transferencia electrónica.
Datos académicos de la tesis doctoral «Aplicación de la resonancia magnética nuclear de sistemas paramagnéticos a la determinación de propiedades estructurales y dinámicas de las proteínas rusticianina y calbindina d9k«
- Título de la tesis: Aplicación de la resonancia magnética nuclear de sistemas paramagnéticos a la determinación de propiedades estructurales y dinámicas de las proteínas rusticianina y calbindina d9k
- Autor: Beatriz Jiménez Garrido
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 22/09/2003
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Antonio Donaire González
- Tribunal
- Presidente del tribunal: manuel Rico sarompas
- Jesús Jiménez-barbero (vocal)
- joaquin Borras tortonda (vocal)
- mario Piccioli (vocal)