Tesis doctoral de Raquel Tabasco Rentero
I. Introducción …………………………………………………………………………………………………………………1 i.1. Alimentos funcionales ……………………………………………………………………………………………1 i.1.1. Leche fermentada……………………………………………………………………………………………………….3 ii.2. Probióticos…………………………………………………………………………………………………………………4 ii.2.1.Probióticos, prebióticos y simbióticos: definiciones. …………………………………………………..4 i.2.2. Microorganismos utilizados como probióticos. ………………………………………………………….5 i.2.3. Características metabólicas de las cepas probióticas. ………………………………………………7 i.2.4. Criterios para la evaluación de probióticos. ……………………………………………………………11 i.2.4.1. Seguridad……………………………………………………………………………………………………………..11 i.2.4.2. Especificaciones funcionales ……………………………………………………………………………………12 i.2.4.2.1. Resistencia al tránsito por el aparato digestivo. ………………………………………………………12 i.2.4.2.2. Adhesión a las células intestinales. ………………………………………………………………………..13 i.2.4.2.3. Propiedades antimutagénicas y anticarcinogénicas………………………………………………….13 i.2.4.2.4. Producción de sustancias antimicrobianas y propiedades antagónicas contra bacterias patógenas. ……………………………………………………………………………………………………………………….14 i.2.4.2.4.1. Bacteriocinas ……………………………………………………………………………………………………14 i.2.4.2.4.2. ácidos orgánicos ………………………………………………………………………………………………15 i.2.4.2.4.3. Otras sustancias antimicrobianas ……………………………………………………………………….15 i.2.4.3. Especificaciones tecnológicas ………………………………………………………………………………….16 i.2.4.3.1. Propiedades organolépticas deseables……………………………………………………………………16 i.2.4.3.2. Mantenimiento de la viabilidad durante el procesado. ……………………………………………..17 i.2.4.3.3. Estabilidad a lo largo del almacenamiento y vida útil del producto. …………………………..17 i.3. Microbiota intestinal humana…………………………………………………………………………..18 i.3.1. Evolución de la microbiota intestinal humana con la edad …………………………………….20 i.3.2. Métodos de estudio de la microbiota intestinal humana. …………………………………………21 i.3.2.1. Métodos tradicionales. ……………………………………………………………………………………………22 i.3.2.2. Métodos moleculares. ……………………………………………………………………………………………..22 i.3.2.2.1. Técnicas moleculares basadas en la reacción en cadena de la polimerasa (pcr). ……….23 i.3.2.2.1.1. Electroforesis en gel de gradiente desnaturalizante (dgge) ………………………………….23 i.3.2.2.1.2.Pcr a tiempo real o cuantitativa (rti-pcr). ………………………………………………………..24 i.3.2.2.1.3. Dna polimórfico amplificado al azar (rapd)………………………………………………………26 i.3.2.2.1.4. Polimorfismo del tamaño de fragmentos de restricción (rflp). Análisis de restricción del dna ribosomal amplificado (ardra). …………………………………………………………………………..27 i.3.2.2.1.5. Secuenciación. ………………………………………………………………………………………………….27 i.3.2.2.2. Técnicas moleculares no basadas en la reacción en cadena de la polimerasa (pcr). …..28 i.3.2.2.2.1. Hibridación dot-blot. …………………………………………………………………………………………28 i.3.2.2.2.2. Hibridación fluorescente in situ (fish) ……………………………………………………………….29 i.3.2.2.2.3. Microarrays. …………………………………………………………………………………………………….29 i.3.2.2.2. Metagenómica. ……………………………………………………………………………………………………30 i.4. Beneficios sobre la salud asociados al consumo de probióticos ………34 i.4.1. Modulación del sistema inmune…………………………………………………………………………………36 i.4.2. Alteraciones intestinales …………………………………………………………………………………………37 i.4.2.1. Inflamatorias. ………………………………………………………………………………………………………..37 i.4.2.2. Infecciones. ……………………………………………………………………………………………………………39 i.4.2.3. Diarrea asociada a tratamiento antibiótico. ………………………………………………………………40 ii. Objetivo y plan de trabajo……………………………………………………………………………………47 iii. Cuantificación selectiva e identificación de cultivos mixtos de streptococcus thermophilus, lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus, l. Acidophilus, l. Paracasei y bifidobacterium lactis en leche fermentada………………………………………………….51 iv. Detección y cuantificación simultánea de bacterias lácticas y bifidobacterias viables en leche fermentada mediante el empleo de monoazida de propidio y pcr a tiempo real……………………………………………61 v. Inhibición de uropatógenos por bacterias lácticas aisladas de productos lácteos e intestinos animales del oeste de nigeria……………………….69 vi. Lactobacillus acidophilus la-5 aumenta la producción de lactacina b cuando siente ciertas bacterias viables……………………………….81 vii. Metabolismo fermentativo de bacterias lácticas y bifidobacterias. inhibición de la colonización de enteropatógenos por lactobacillus acidophilus……………………………………………………..91 viii. Efecto en la microbiota intestinal de las bacterias probióticas contenidas en leche fermentada empleadas para la prevención de la diarrea asociada a antibióticos……………………………………….117 ix. Discusión general………………………………..143 ix.1. Viabilidad e identificación de bacterias probióticas………………………..145 ix.2. Mecanismos de competencia de las bacterias probióticas…152 ix.3. Efecto de las bacterias probióticas en la diarrea asociada a……159 x. Conclusiones……………………………….163 xi. Bibliografía…………………………………………..167
Datos académicos de la tesis doctoral «Bacterias probioticas en leche fermentada. viabilidad,capacidad competitiva y efecto en la evolución de patologías intestinales«
- Título de la tesis: Bacterias probioticas en leche fermentada. viabilidad,capacidad competitiva y efecto en la evolución de patologías intestinales
- Autor: Raquel Tabasco Rentero
- Universidad: Autónoma de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 23/10/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Carmen Pelaez Martinez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: guillermo Reglero rada
- abelardo Margolles barros (vocal)
- leónides Fernández álvarez (vocal)
- María victoria Moreno arribas (vocal)