Tesis doctoral de Julia Victoria Marín Navarro
En este trabajo se ha profundizado en el conocimiento de los mecanismos que regulan la actividad y la disponibilidad proteolítica de la rubisco a través del estado de oxidación de resíduos de cisteína del propio enzima. se han estudiado los siguientes aspectos concretos dentro de este tema: 1,- patrón diferencial de proteolisis de rubisco reducida y oxidada. los resultados indican que la oxidación de cisteínas conservadas de la rubisco induce un cambio conformacional progresivo que favorece la exposición del lazo sergi-thr68 de la subunidad grande a la acción de proteasas exógenas. el corte proteolítico en este lazo promueve el desembalaje y la digestión completa del enzima. la proteolisis de la rubisco por subtilisina se modelizó mediante un sistema de tres ecuaciones diferenciales acopladas. El modelo obtenido describe correctamente la cinética de proteolisis y puede utilizarse como herramienta para detectar cambios conformacionales y comportamientos anómalos en enzimas mutantes. 2,- la obtención de mutantes de rubisco por sustitución de resíduos conservados con cisteína. se obtuvieron mutantes fotosintéticamente activos de cisteínas conservadas de la subunidad grande (c84s, c247s, c427s, c449s, c459s y c449ssic45as) y de la subunidad pequeña (c42s, c83s) de la rubisco. 3,- papel del par c4549-c4545s9 en la modificación redox de la rubisco. los resultados obtenidos en este apartado indican que los resíduos de cisteína 449 y 459 de la subunidad grande de la rubisco son necesarios para inactivar completamente el enzima a potenciales redox elevados y favorecen la exposición del lazo sergi-thr68 a la acción de proteínas exógenas in vitro en condiciones oxidantes. El doble mutante acumula una mayor cantidad de biomasa por célula y responde al estrés intensificando la agregación, movilización a la fracción membranosa e inactivación del enzima.
Datos académicos de la tesis doctoral «Contribución de resíduos conservados de cisteína a la regulación redox del catabolismo de la rubisco«
- Título de la tesis: Contribución de resíduos conservados de cisteína a la regulación redox del catabolismo de la rubisco
- Autor: Julia Victoria Marín Navarro
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 18/06/2004
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Joaquin Moreno Mariño
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Juan Carbonell gisbert
- Emilio Fernandez reyes (vocal)
- Esquivel María da gloria (vocal)
- vicente Rubio zamora (vocal)