Tesis doctoral de Nuria Arranz Guerrero
Null el objetivo principal de esta investigación consistió en evaluar el efecto protector de los compuestos organosulfurados (oscs), de los isotiocianatos (itcs) y de la vitamina c, frente al daño al dna inducido por las n-nitrosaminas presentes en los al imentos. Así como, en determinar los posibles mecanismos de acción por los que estos compuestos quimiopreventivos ejercen su efecto protector. Para ello, se utilizó la línea celular de hepatoma humano (hepg2) y la electroforesis alcalina de células i ndividuales, conocida también como ensayo cometa, con una modificación, que consistió en utilizar las enzimas formamidopirimidina-dna-glicosilasa (fpg) y endonucleasa iii (endo iii), que detectan respectivamente la oxidación de las purinas y de las p irimidinas.En la primera etapa de este trabajo, evaluamos el daño al dna inducido por la n-nitrosopirrolidina (npyr) y la n-nitrosodimetilamina (ndma). Ambas n-nitrosaminas indujeron la ruptura de las cadenas del dna y la oxidación de las bases púric as, aunque la npyr resultó ser la más genotóxica.Posteriormente, determinamos si la npyr y la ndma inducían apoptosis en dos líneas tumorales humanas: células de hepatoma (hepg2) y de leucemia (hl-60), utilizando diferentes técnicas como la microscop ía de fluorescencia, la citometría de flujo (método tunel) y el western blot [(ruptura de la poli (adp-ribosa) polimerasa (parp)]. También evaluamos si la apoptosis inducida por la npyr y la ndma en la línea celular hepg2 está mediada por caspasas y cuál es la principal vía de activación. Las dos n-nitrosaminas mostraron un efecto citotóxico en las células hepg2 y hl-60, mediante la inducción de apoptosis. En la segunda etapa de esta investigación evaluamos el efecto protector de los oscs [el di alil sulfuro (das), el dialil disulfuro (dads), el dipropil sulfuro (dps) y el dipropil disulfuro (dpds)], los itcs [el fenetil isotiocianato (peitc), el alil isotiocianato (aitc) y el indol-3-carbinol (i3c)], y la vitamina c frente al daño al dna i nducido por la npyr y la ndma.Los resultados mostraron que los oscs, los itcs y la vitamina c protegieron frente al daño al dna inducido por ambas n-nitrosaminas, aunque el efecto protector fue mayor frente a la npyr.Posteriormente, estudiamos los po sibles mecanismos de acción por los que estos compuestos ejercen su efecto protector. Para ello, determinamos la actividad de las enzimas del citocromo p450 de la fase i (cyp 2e1 y 2a6) y de la fase ii (udp-gt1a4), utilizando microsomas de células de
Datos académicos de la tesis doctoral «Efecto protector de compuestos organosulfurados, isotiocianatos y vitamina c frente al daño al dna inducido por n-nitrosaminas presentes en los alimentos: mecanismos de acción«
- Título de la tesis: Efecto protector de compuestos organosulfurados, isotiocianatos y vitamina c frente al daño al dna inducido por n-nitrosaminas presentes en los alimentos: mecanismos de acción
- Autor: Nuria Arranz Guerrero
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 05/06/2009
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Paloma Morales Gómez
- Tribunal
- Presidente del tribunal: María isabel (secretario) González alonso
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