Tesis doctoral de Ester Carreras Margalef
La proteína catiónica de eosinófilo (ecp) es una ribonucleasa que se encuentra en los gránulos secundarios de los eosinófilos. Los niveles de ecp en los fluidos corporales se utilizan como indicador del número y activación de los eosinófilos. La ecp es tóxica para diversos patógenos como son bacterias, helmintos y virus y para células de mamífero. para identificar immunológicamente la ecp se ha seleccionado una región específica de la proteína (d112-p123) como posible epítopo antigénico. la región d112-p123 no se encuentra en la rnasa a, 1,4 y 5 y es donde se observa la máxima desviación del esqueleto de la cadena principal de la ecp y la neurotoxina derivada de eosinófilo (edn) con la que comparte un 67% de identidad de secuencia. Se han inmunizado conejos con un péptido sintético (d112-p123) conjugado a una proteína transportadora y se han purificado los anticuerpos policlonales con una columna de afinidad con la ecp inmovilizada. el anticuerpo d112-p123 reconoce específicamente la ecp en condiciones reductoras y no reductoras y no presentan reactividad cruzada ni con la edn ni con la rnasa a ni con otras proteínas control. La imunodetección por transferencia western con el anticuerpo d112-p123 ha mostrado que hay una relación lineal entre la cantidad de proteína (1-75 ng) y el señal obtenido. Se ha ensayado la reactividad del anticuerpo d112-p123 en fluidos corporales y granulócitos. El anticuerpo d112-p123 detecta la forma nativa no glicosilada y las formas glicosiladas de la ecp en granulócitos, esputo y plasma. Se ha obtenido una buena correlación entre los niveles de ecp determinados con el anticuerpo d112-p123 y un anticuerpo que comercialzia pharmacia & upjohn (uppsala, suecia). para estudiar la relación entre la estructura y las actividades biológicas de la ecp se han obtenido variantes de la proteína en residuos específicos de la ecp. Se han escogido residuos catiónicos y aromá
Datos académicos de la tesis doctoral «Identificación inmunológica y caracterización de las propiedades biológicas de la proteína catiónica de eosinófilo«
- Título de la tesis: Identificación inmunológica y caracterización de las propiedades biológicas de la proteína catiónica de eosinófilo
- Autor: Ester Carreras Margalef
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 07/05/2004
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Nogués Bara M. Victória
- Tribunal
- Presidente del tribunal: emili Itarte fresquet
- marc Ribó panosa (vocal)
- dolors Fondevila palau (vocal)
- María Vilanova brugués (vocal)