Tesis doctoral de Alcalá Morales Pilar Lucía
Una de las aplicaciones de la ingeniería de proteínas es el desarrollo de biosensores moleculares como herramientas para la detección de sustancias mediante la interacción de una macromolécula y su ligando. De acuerdo a este principio se han generado una serie de prototipos de biosensores enzimáticos que ha surgido a partir de la ingeniería de proteínas tales como la fosfatasa alcalina, beta-galactosidasa, beta-lactamasa y la proteína tsp del bacteriófago p22. En todas estas enzimas modificadas se han insertado péptidos inmunoreactivos que actúan como sondas, en aquellos sitios permisivos de las superficies expuestas al solvente de cada enzima. La unión con anticuerpos anti-péptido da como resultado un aumento o una disminución en la actividad enzimática en una forma dependiente del título, lo que a su vez constituye un método simple para la detección y cuantificación de especies moleculares dentro de una mezcal compleja. hasta el momento los únicos activadores descritos de los biosensores basados en enzimas son los anticuerpos y aún se desconoce el mecanismo por el cual que se produce esta regulación enzimática. El principal objetivo de este trabajo ha sido determinar el tipo de interacciones moleculares que son necesarias para que se lleve a cabo la modulación de la actividad beta-galactosidasa. especialmente, se pretendía evaluar la necesidad de una unión bivalente para la reactivación y explorar la adaptación de los biosensores beta-galactosidasa a la detección de ligandos monovalente, como antígenos. se evaluó la interacción molecular entre un péptido rgd recombinante del virus de la fiebre aftosa, expuesto en la superficie de una proteína portadora y sus receptores en la superficie celular. Como ligandos se utilizaron las integrinas alfavbeta3 y alfa5beta1 solubles, así como células bhk21. los resultados indicaron que ni las integrinas solubles ni aquellas expuestas en las células son capaces
Datos académicos de la tesis doctoral «Ingeniería de anticuerpos aplicada al desarrollo y caracterización de biosensores enzimáticos«
- Título de la tesis: Ingeniería de anticuerpos aplicada al desarrollo y caracterización de biosensores enzimáticos
- Autor: Alcalá Morales Pilar Lucía
- Universidad: Autónoma de barcelona
- Fecha de lectura de la tesis: 28/02/2003
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Antonio Villaverde Corrales
- Tribunal
- Presidente del tribunal: enrique Querol murillo
- Miguel ángel Martínez de la sierra (vocal)
- albert Bosch navarro (vocal)
- antoni Benito mundet (vocal)