Tesis doctoral de Antonio Fernández Dumont
La posibilidad de intercambiar tanto los líderes como los sistemas de secreción y procesado que intervienen en la biosíntesis de diversas bacteriocinas puede ser explotada para conseguir la producción heteróloga de estos péptidos antimicrobianos.En este trabajo se ha conseguido la producción de las bacteriocinas lactococina a,pedicina pa-1 y colicina v en lactococcus lactis.Además , se ha conseguido la producción de una proteína eucariota, la citoquina interleuquina-2 en esa misma especie.Para ello , ha sido necesaria la introducción de tres genes:(a) un gen estructural híbrido con la fusión , en un mismo marco de lectura , de las secuencias que codifican el líder de la lactococina a y el propéptido de interés(prolactococina a,propediocina pa-1,procolicina v o proninterleuquina-2)y (b) los genes icnc y lcnd,que codifican elsistema de secreción y procesado de la lactococina a. los genes estructurales híbridos se construyeron de tal modo que su expresión estuviera controlada por el promotor inducible de la misina(pmisa).El proceso de autoregulación de la biosínteeis de nisina se ha aplicado con éxito par la producción heteróloga de péptidos en diversas especies y géneros de bacteras lácticas.Para ello, se requieren tres elementos esenciales:(a) una cepa de contenga los genes nisrk;(b) la adición de nisina como molécula inductora; y c que el gen de interés esté controlado por el promotor pmisa.Las cepas empleadas como hospedadoras fueron l. Lactis fi5876, una capa productora de nisina, y l.Lactis fi7847 , una cepa no bacteriocinogénica.Las dos cepas contienen el transposón tn5301,que porta la agrupaciónde genes de la nisina , incluidos los genes nisrk.En el caso de l. Lactis fi7847, el gen estructural de la nisina (nisa) ha sufrido una delección que impide su expresión y, en consecuencia, la producción de esta bacteriocina. la introducción de dos plástidos compatibles (un derivado de ptg262 con el
Datos académicos de la tesis doctoral «Producción inducible de lactococina a, pediocina pa-1, colicina v e interleuquina-2 en cepas de lactococcus lactis productoras de nisina«
- Título de la tesis: Producción inducible de lactococina a, pediocina pa-1, colicina v e interleuquina-2 en cepas de lactococcus lactis productoras de nisina
- Autor: Antonio Fernández Dumont
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 09/07/2004
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Rodriguez Gómez Juan Miguel
- Tribunal
- Presidente del tribunal: Juan Antonio Ordoñez pereda
- carmen Torres manrique (vocal)
- arjan Narbad (vocal)
- eva Rodríguez mínguez (vocal)