Tesis doctoral de Adela Villanueva Roig
El género aspergillus se emplea como hospedador para producir proteínas homólogas o heterólogas. Estos organismos proporcionan ventajas frente al uso de otros sistemas microbianos como los desarrollados en escherichia coli, pichia pastoris o saccharomyces cervisiae, como el correcto procesado post-transcripcional del rna mensajero o una menor glicosilación de la proteína diana. en este trabajo se han desarrollado sistemas para la producción de proteínas de interés alimentario en el organismo modelo asperguillus nidulans. Estos sistemas están basados en el empleo de promotores de los genes xina y xinb que codifican las xilanasas x22 y x24 respectivamente de a.Nidulans. Dichos promotores son inducibles por xilano o xilosa y también por el ph ambiental. el gen eg/1 de trichodema longibrachaiatum que codifica una endoglucanasa de interés enológico fue clonado en dichos vectores, así como en otro en el que se situaba bajo el control del promotor del gen gpda de a.Nidulans que tiene una expresión constitutiva indpendiente del ph ambiental. se construyeron transformantes de a.Nidulans que contienen una única copia de estos vectores integrada en el locus argb. Al comparar la secreción de la enzima egl1 en dichos transformantes se observó que el promotor gpda funcionaba de forma más eficaz. En todos los casos el rendimiento fue mayor en cultivos con xilano como inductor, aunque en cultivos de transferencia a xilosa o xilano había menor secreción de proteínas contaminantes. Al llevar a cabo crecimientos de estos transformantes en fermentador, se observó de nuevo que los transformantes que contenían el promotor del gen gpda funcionan de forma eficaz a valores de ph alcalino. posteriormente se obtuvieron transformantes multicopia con estas construcciones en cepas de a. Nidulans, a. Niger y a. Terreus. observando que en el caso de a. Terreus se producía la regulación por xilosa y la represión por glucosa. En el caso d
Datos académicos de la tesis doctoral «Desarrollo y aplicación de sistemas para la producción específica de enzimas de uso en enología«
- Título de la tesis: Desarrollo y aplicación de sistemas para la producción específica de enzimas de uso en enología
- Autor: Adela Villanueva Roig
- Universidad: Universitat de valéncia (estudi general)
- Fecha de lectura de la tesis: 18/12/2002
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- P. Maccabe Andrew
- Tribunal
- Presidente del tribunal: federico Uruburu fernández
- Lluch rodríguez m. angeles (vocal)
- Manuel Gallardo josé (vocal)
- Manuel Guillamón josé (vocal)