Tesis doctoral de Mª Pilar Alfonso Palacín
La enfermedad de gaucher (eg) es una de las enfermedades heriditarias lisosomales más frecuentes, debida a un déficit en la enzima lisosomal glucocerebrosidasa. se caracteriza clínicamente por un aumento visceral (principalmente del bazo e hígado), anemia, citopenia, lesiones óseas, y en algunos casos, se asocia a afectación neurológica. La eg presenta una gran variabilidad, tanto en la sintomatología, como en la respuesta de los pacientes al tratamiento enzimático sustitutivo (tes). Esta heterogeneidad se atribuye, en parte, al gran número de mutaciones que se encuentran en el gen de la glucocerebrosidasa. por ello, el objetivo principal de esta tesis fue identificar las mutaciones responsables de la enfermedad, caracterizarlas y conocer la actividad residual de las enzimas recombinantes, para poder así predecir la evolución clínica de los pacientes con la eg y su respuesta al tes. para conseguir este objetivo, se emplearon técnicas fluorométricas para medir la actividad enzimática, técnicas bioquímicas basadas en la reacción en cadena de la polimerasa (pcr), conformación de polimorfismos de cadena sencilla (sscp), secuenciación automática y análisis de restricción con endonucleasa para identificar y caracterizar las mutaciones. Se sintetizaron por el procedimiento de mutagénesis dirigida proteínas recombinantes portadoras de las nuevas mutaciones encontradas y se expresaron en células de mamífero de la línea cos para medir su actividad residual y conocer, así, la gravedad de las mutaciones estudiadas. Estos análisis ayudan a un mejor entendimiento de las bases moleculares y de la patogenia de la enfermedad de gaucher. sin embargo, los resultados de la expresión de las proteínas mutadas son necesarios, pero no suficientes, para explicar el fenotipo clínico de la eg. Para descifrar qué otros factores podrían influir en el fenotipo de la enfermedad se llevaron a cabo análisis empleando la tecno
Datos académicos de la tesis doctoral «Identificación y caracterización de las mutaciones responsables de la enfermedad de gaucher. estudio de la relación genotipo/fenotipo«
- Título de la tesis: Identificación y caracterización de las mutaciones responsables de la enfermedad de gaucher. estudio de la relación genotipo/fenotipo
- Autor: Mª Pilar Alfonso Palacín
- Universidad: Zaragoza
- Fecha de lectura de la tesis: 21/01/2004
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- Miguel Pocovi Mieras
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José Carlos Rodriguez rey
- Juan ignacio Perez calvo (vocal)
- Manuel Giralt raichs (vocal)
- carmen Domínguez luengo (vocal)