Tesis doctoral de Pablo Estanislao Bilbao Ramos
La leishmaniosis es una enfermedad prevalente en más de 98 países. En latinoamérica, es endémica y bolivia registró la mayor tasa de incidencia en 2006 (33 casos por cada 100.000 habitantes), de los cuales más del 50% se localiza en la región subandina del departamento de la paz.Los objetivos de esta tesis fueron: 1) identificar las especies de leishmania circulantes en el departamento de la paz (bolivia), 2) evaluar su susceptibilidad a fármacos en el modelo in vitro y 3) búsqueda de alternativas terapéuticas.Se analizaron 55 aislados bolivianos de leishmania, mediante técnicas moleculares (pcr-rflp y secuenciación) empleando tres marcadores: los espaciadores internos de transcripción its-1, los genes de la proteína de choque térmico (hsp70-i) y del citocromo b (cit-b). También, se validaron métodos espectroscópicos (colorimétricos y fluorimétricos), para la evaluación de la susceptibilidad en promastigotes y amastigotes intracelulares de leishmania y se evaluó la actividad leishmanicida de nuevas alternativas terapéuticas.Se identificaron tres entidades taxonómicas de leishmania circulando en bolivia. Así, el 65,5 por ciento de los aislados analizados se correspondían con el perfil de l. (V.) Braziliensis, 27,3 % con el complejo l. (Leishmania) mexicana y 7,3 % con l. (V.) Lainsoni. Además, el análisis de las secuencias del cit-b permitió identificar polimorfismos intraespecíficos en l. (V.) Braziliensis y en l. (L.) Mexicana.Todos los aislados bolivianos de leishmania fueron altamente susceptibles a la fungizona (0,23 0,93 microg/ml), en cambio frente a la miltefosina la susceptibilidad fue muy variable, siendo notablemente más susceptible l. (L.) Mexicana (0,86 microg/ml), seguida de l. (V.) Lainsoni y l. (V.) Braziliensis (30,56 microg/ml). De todas las formulaciones de anfotericina b (anb), se destaca la actividad in vitro de la anb poliagregada libre o encapsulada en microesferas de albúmina, además del gel de anb monomérica en complejos de ¿-ciclodextrinas por su reducida citotoxicidad.Entre los metabolitos secundarios de piper spp, se destaca la potente actividad de las chalconas pdp5 (2¿,3-dihidroxi-4¿,6¿,5-trimetoxi-chalcona), pdp23 (2,4-dihidroxi-3,6-dimetoxi-chalcona) y pdp24 (2,3-dihidroxi-4,6-dimetoxi-chalcona) aisladas de piper delineatum y las amidas ppp12 (e-piplartina) y ppp13 (z-piplartina), aisladas de piper pseudoarboreum.De los compuestos de síntesis química, es de notable interés la actividad leishmanicida de las sulfonamidas 1a (4-nitro-n-pirimidin-2-il bencen-sulfonamida), 2d (4-cloro-n-5-metil-tiazol-2-il-bencen-sulfonamida), 1n (4-nitro-n-pirazin-2-il-bencen-sulfonamida), 6d (4-fluoro-n-isoquinolin-5-il-bencen-sulfonamida), 8c (n-(2-metil-1h-indol-5-il)-bencen-sulfonamida), 9c (n-(1h-indazol-5-il)-bencen-sulfonamida), 12c (n-benzotiazol-6-il-bencen-sulfonamida) y 14d (3-metil-1-(naftalen-1-sulfonil)-piperidina) por su acción leishmanicida sin mostrar efectos citotóxicos.Entre las oxoisoaporfinas hay que destacar la actividad, en promastigotes y amastigotes intracelulares, de oxo1 (2,3-dihidro-7h-dibenzo [de,h] quinolin-7-ona), oxo13 (2,3,8,9,10,11-hexahidro-7h-dibenzo [de,h] quinolin-7-ona), a4 (6-metoxi-7h-benzo[e]perimidin-7-ona) y a8 (6-hidroxi-2-metil-7h-benzo[e]perimidin-7-ona).En conclusión, esta memoria describe la circulación de 3 taxones de leishmania como los agentes causales de la leishmaniosis en bolivia. También resalta la marcada variación de la susceptibilidad a los tratamientos de elección inter e intraespecies, especialmente en el subgénero leishmania (viannia). Además, se propone una selección de compuestos y formulaciones potencialmente activos frente a diferentes especies de leishmania como posibles alternativas terapéuticas.
Datos académicos de la tesis doctoral «Caracterización molecular y evaluación de la susceptibilidad de especies de leishmania, circulantes en bolivia, a nuevos fármacos y formulaciones«
- Título de la tesis: Caracterización molecular y evaluación de la susceptibilidad de especies de leishmania, circulantes en bolivia, a nuevos fármacos y formulaciones
- Autor: Pablo Estanislao Bilbao Ramos
- Universidad: Complutense de Madrid
- Fecha de lectura de la tesis: 22/06/2014
Dirección y tribunal
- Director de la tesis
- María Auxiliadora Dea Ayuela
- Tribunal
- Presidente del tribunal: José María Alunda rodríguez
- Jorge Pérez serrano (vocal)
- Francisco Javier Nieto martínez (vocal)
- José María Requena solanía (vocal)